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        上海博耀生物科技有限公司
          
            主營產(chǎn)品： elisa試劑盒,一抗,二抗，抗體,ABI 
            		
      
            
    
                
    
            
                
            
            
    
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            聯(lián)系電話
            
            
            
                      18021003406 
                      
            
        
            
    
             
       
            
    
            
	     
            您現(xiàn)在的位置： 首頁> 技術(shù)文章 > 人晚期氧化蛋白產(chǎn)物（AOPP）定量檢測試劑盒（ELISA）
            
  
            
    
            
      

      
            
            
            
            
            
            
      
            
      
      
      
            公司信息
            
      
            
         
             
            
                    
            
          
            聯(lián)系人：
            
          
            王羽
            
        
            
                        
            
              
            電話：
            
              
            18021003406
            
            
            
                            
            
                  
            手機：
            
                  
            18021003406
            
                
            
                                    
            
              
            傳真：
            
              
            
            
            
        	        
            
          
            地址：
            
          
            上海市閔行區(qū)景聯(lián)路439號
            
        
            
          
            
              
            郵編：
            
              
            
          
            
          
                        
            
                
            個性化：
            
                
            
                                        
                                            www.boyaosw.com
                
            
            
            
                        
            
          
            網(wǎng)址：
            
          
            shkmsw.biomart.cn/
            
        
            
                
            
          
            商鋪：
            
          
             http://apwanrong.com/st179893/ 
            
        
            
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            人晚期氧化蛋白產(chǎn)物（AOPP）定量檢測試劑盒（ELISA）
            2012-11-26　閱讀(1838)
            
      
            
      
            
  
             
            僅供科研使用，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。
            使用前仔細閱讀本說明書。
             
            用    途：用于定量檢測人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中晚期氧化蛋白產(chǎn)物（AOPP）的含量。
            工作原理
            本試劑盒采用雙位點夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），測定樣品中人晚期氧化蛋白產(chǎn)物（AOPP）的水平。向預(yù)先包被人晚期氧化蛋白產(chǎn)物（AOPP）抗體的酶標孔中加入標準品、待測樣本和HRP標記的晚期氧化蛋白產(chǎn)物（AOPP）抗體，經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的組分，然后再加入底物A、B，產(chǎn)生藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺與樣品中人晚期氧化蛋白產(chǎn)物（AOPP）的濃度呈正相關(guān)。
            試劑盒組成
                        
                                    
            1
                                    		                        
            標準品（400ng/ml）
                                    		                        
            0.5ml
                                    		                        
            7
                                    		                        
            顯色劑A液
                                    		                        
            6ml
                                    		        
                    
                                    
            2
                                    		                        
            標準品稀釋液
                                    		                        
            6mL
                                    		                        
            8
                                    		                        
            顯色劑B液
                                    		                        
            6ml
                                    		        
                    
                                    
            3
                                    		                        
            酶標包被板
                                    		                        
            12孔×8條
                                    		                        
            9
                                    		                        
            終止液
                                    		                        
            6ml
                                    		        
                    
                                    
            4
                                    		                        
            酶標試劑
                                    		                        
            6ml
                                    		                        
            10
                                    		                        
            說明書
                                    		                        
            1份
                                    		        
                    
                                    
            5
                                    		                        
            20×濃縮洗滌液
                                    		                        
            20ml
                                    		                        
            11
                                    		                        
            封板膜
                                    		                        
            2張
                                    		        
                    
                                    
            6
                                    		                        
            樣品稀釋液
                                    		                        
            6ml
                                    		                        
            12
                                    		                        
            密封袋
                                    		                        
            1個
                                    		        
                
            注：標準品用標準品稀釋液依次稀釋為：400、200、100、50、25、0 ng/ml
            需要而未提供的試劑和器材
            1． 37℃恒溫箱。
            2． 標準規(guī)格酶標儀。
            3． 精密移液器及一次性吸頭
            4． 蒸餾水，
            5． 一次性試管
            6． 吸水紙
            注意事項
            1． 從2-8℃取出的試劑盒，在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
            2． 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差
            3． 建議所有標準品、樣本都做雙份檢測。
            4． 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
            5． 為避免交叉污染，要避免重復(fù)使用手中的吸頭和封板膜。
            6． 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
            7． 底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。
            洗板方法
            手工洗板方法：甩掉酶標板內(nèi)的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要，重復(fù)此過程數(shù)次。
            自動洗板：如果有自動洗板機，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中
             
            標本要求
            1．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
            2．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
            操作程序
            1． 分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準品孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品孔中加入標準品50μl；在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。輕輕晃動混勻，37℃溫育60分鐘。
            2． 棄去液體，甩干，每孔加滿稀釋后洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。如此重復(fù)5次，拍干。
            3． 每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
            4． 取出酶標板，每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
            5． 測定：以空白孔調(diào)零，在450nm波長下測量各孔的吸光度值（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
            6． 根據(jù)標準品的濃度及對應(yīng)的OD值計算出標準曲線的直線回歸方程，再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度。也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。應(yīng)記住由于樣品稀釋了的，其實際濃度應(yīng)該乘以總稀釋倍數(shù)。
            操作程序總結(jié)：
            準備試劑，樣品和標準品
             

             
            加入準備好的樣品、標準品和酶標試劑，37℃反應(yīng)60分鐘
             
            洗板5次，加入顯色液A、B，37℃顯色15分鐘
             
            加入終止液
             
            15分鐘之內(nèi)讀OD值
             
            計算
             
            檢測范圍：6.25 ng/ml -400ng/ml。
            規(guī)格：    96T/盒
            保存：    2-8℃ 
            有效期： 6個月（2-8℃）。
             
            
      
            
      
      
      
            
    
            
    
            
  
            
  
            





 




 
   
    
        
    

		
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    

    

     
     
     
	 





 





            




            


            
        
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