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            上海博耀生物科技有限公司

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            培養(yǎng)基培養(yǎng)方法

            2014-11-27 閱讀(2994)

                   培養(yǎng)基是供微生物、植物組織和動(dòng)物組織生長和維持用的人工配制養(yǎng)料,一般含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽(包括微量元素)、維生素和水等,有的還含有抗菌素、色素、激素和血清。培養(yǎng)基由于配制的原料不同、使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同;液體培養(yǎng)基不易長期保管,均改制成粉末。

            培養(yǎng)基培養(yǎng)方法:

            1.配料

            配方換算→在容器中加入少量水〔蒸餾水,自然水〕→按照配方稱取各種藥品〔依次加入〕→加足所需水量《一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋》。

            2.溶解

            淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀

            加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95~97℃ ,且需要邊

            加熱邊攪拌以防止燒焦。

            3.調(diào)PH

            用1N的鹽酸或的1N NaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。

            4.過濾

            濾紙或棉花進(jìn)行過濾。

            5.分裝

            一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。

            (1)三角瓶

            若作靜置培養(yǎng),則100 ml培養(yǎng)基/250 ml的三角瓶,zui多不能超過150 ml培養(yǎng)基/250 ml的三角瓶,否則滅菌時(shí)培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養(yǎng),則15~20 ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。

            (2)試管分裝

            液體培養(yǎng)基一般裝4~5 ml,約試管的1/4高度;

            固體斜面培養(yǎng)基一般裝3~4 ml,約試管的1/5高度。

            6.包扎

            分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時(shí)水份進(jìn)入把棉塞弄濕。

            7.滅菌

            按配方上要求的溫度、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營養(yǎng)成分會(huì)被破壞,培養(yǎng)

            基中的糖、氨基酸會(huì)使培養(yǎng)基的顏色變深。

            8.擺斜面

            滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個(gè)斜面,約占試管長度的1/2。

            9.貯存

            培養(yǎng)基在30℃下放置一天,無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。  



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