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TTE濃縮液//TTE - 20X LIQ. CONC./E445-1L （1） 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。如果一抗自己帶有可以被檢測(cè)出的標(biāo)記（如帶熒光、放射性、化學(xué)發(fā)光或顯色基團(tuán)），則不需要二抗。對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品（對(duì)照品）濃度降低會(huì)導(dǎo)致用其作為對(duì)照測(cè)得的藥品的含量比實(shí)際含量高，這樣一方面有可能使含量偏低而不合格的藥品因此變成合格的藥品，另一方面也影響了原料藥和中間體的質(zhì)量控制。 用戶應(yīng)該認(rèn)識(shí)到制備工作標(biāo)準(zhǔn)代替有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí)需要附加的費(fèi)用，特別是對(duì)化學(xué)成分定值的復(fù)雜成分物料，制備與實(shí)際樣品組成匹配的工作標(biāo)準(zhǔn)，其花費(fèi)可能超過(guò)購(gòu)買有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。在這種情況下，推薦使用有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。在質(zhì)量控制計(jì)劃中把有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)作為未知檢驗(yàn)“盲樣"來(lái)使用，有可能也是誤用，特別是一些專門技術(shù)領(lǐng)域中僅有少數(shù)有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，它們很容易被識(shí)別，因而達(dá)不到“盲樣"的預(yù)期目的。

名稱：TTE濃縮液
品牌：AMRESCO
Item Description：TTE - 20X LIQ. CONC.
Code：E445-1L
級(jí)別：
CAS：
Size：1L
Shipping Temperature：
Hazardous Shipping Charges Apply*：
Hazard Label for Container*：
UN#*：
UNSPSC #：
Shelf Life from Date of Manufacture**：
Parent Category：
Child Category：
Grade：


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elisa實(shí)驗(yàn)步驟：1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。 4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。（4） 酶的底物及供氫體的選擇：對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無(wú)色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。elisa封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 底物請(qǐng)避光保存。 嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn). 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。試劑不同批號(hào)組分不得混用。
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