化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
技術(shù)在線解答浙江大學(xué)學(xué)生ELISA洗板操作相關(guān)問題
閱讀：1241 發(fā)布時間：2015-7-29七月初，浙江大學(xué)張同學(xué)由學(xué)校實驗室的其他同學(xué)介紹與我司取得。并訂購了人MDA、GSH-PX、SOD、TAOC ELISA試劑盒。星期一老師做了人GSH-PX elisa實驗。介紹自己在洗板操作過程遇到棘手問題，麻煩我司技術(shù)給她提供解決處理方法及建議。主要問題如下：
問題一：說明書上說洗板時要把孔里的水甩干，可我做的時候，無論我怎么拍，孔底還是有殘留液體，請問這對試驗有沒有影響？或著有沒有別的什么好的辦法可以解決這個問題？
答：有一定的影響.尤其二抗反應(yīng)后洗滌不好，會出現(xiàn)非特異.ELISA試驗中洗滌是關(guān)鍵.盡可能甩干,而且盡量少拍,不一定每次都很干,但是zui后一次洗滌要盡量干.洗滌中另一個值得注意的是盡量不要出氣泡. 如果有條件的話，可用洗板機。
問題二：什么才叫封閉好了呢?有沒有什么標(biāo)準(zhǔn)?
答：一般用1%BSA，150μl，37度，2h，如果還有非特異反應(yīng)的話，可能有其他原因，比如加樣時濺到了壁上或有氣泡，洗滌不充分，二抗?jié)舛冗^高，封閉物不合適以及反應(yīng)條件是否得當(dāng)?shù)取?/SPAN>
問題三：1%bsa,你是用什么稀釋的,我用過pH9.6的cbs和pH7.4的pbs稀釋,結(jié)果封閉的效果都不怎么明顯,與不封閉差不多.
答：1%BSA用PBS稀釋就可以了。還有就是要注意你的操作，背景高不一定是封閉的問題。
在我司技術(shù)的指導(dǎo)下，張老師相繼完成了人MDA、SOD、TAOC 三個ELISA實驗。并且實驗取得預(yù)期理想結(jié)果。張老師對我司的產(chǎn)品跟服務(wù)表示感謝。并表示后續(xù)將繼續(xù)與我司合作且將我司介紹給其他同學(xué)。在此，我司對張老師也表示感謝，承諾將一直為客戶提供zui的試劑盒跟服務(wù)！