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ELISA試劑盒測(cè)定影響因素之一操作因素
閱讀：1212 發(fā)布時(shí)間：2015-8-12 ELISA方法被廣泛用于各種抗原和抗體測(cè)定。但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在臨床檢驗(yàn)中如果處理不當(dāng)，會(huì)出現(xiàn)一些錯(cuò)誤結(jié)果。引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：（1）標(biāo)本因素；（2）操作因素；（3）試劑因素；上海恒遠(yuǎn)就操作因素對(duì)ELISA測(cè)定的影響做如下討論：
操作因素
1 溫育的影響
溫育是影響ELISA測(cè)定結(jié)果的關(guān)鍵因素。溫育時(shí)間不夠，弱陽(yáng)性標(biāo)本檢測(cè)不出；溫育溫度不夠，弱陽(yáng)性標(biāo)本也難以檢出。
2 洗板的影響
洗板對(duì)ELISA測(cè)定來(lái)說(shuō)也是關(guān)鍵步驟。洗板分手工洗板和機(jī)器洗板，一般認(rèn)為機(jī)器洗板較手工洗板效果要好，關(guān)鍵是洗板次數(shù)的選擇。洗板次數(shù)較少，造成殘留，可引起假陽(yáng)性結(jié)果；洗板次數(shù)過(guò)多，可造成抗原抗體結(jié)合物洗脫，造成假陰性結(jié)果。
3 顯色的影響
影響顯色的關(guān)鍵是顯色溫度和顯色時(shí)間，有些實(shí)驗(yàn)室操作人員不嚴(yán)格按說(shuō)明書操作，因?yàn)閾?dān)心“花板"，往往是顯色時(shí)間不到就匆忙終止顯色，結(jié)果造成弱陽(yáng)性標(biāo)本不能顯色而導(dǎo)致假陰性發(fā)生。
4 加樣的影響
加入樣品、試劑及混勻時(shí)間的差異稱為操作時(shí)差。操作時(shí)差在每個(gè)試驗(yàn)中都存在，尤為手工操作更著，對(duì)結(jié)果都會(huì)產(chǎn)生或大或小的影響。ELISA常用項(xiàng)目，例如：乙肝兩對(duì)半，多是成批檢測(cè)。從加*個(gè)樣本到zui后一個(gè)樣本，包括中間換吸管尖的工作，在這一過(guò)程中有一個(gè)時(shí)間差；加試劑及混勻也同樣存在時(shí)間差，這種操作時(shí)間差會(huì)致使抗原抗體反應(yīng)和酶促反應(yīng)時(shí)間的不一致，而這種不一致可以直接導(dǎo)致誤差的產(chǎn)生，尤其是在夏天，若不合理安排時(shí)間、盡量減少時(shí)差，將會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性或假陰性的結(jié)果出現(xiàn)。
以上是操作因素對(duì)ELISA檢測(cè)的影響，更多信息可通過(guò)掃描下方二維碼或搜索公眾號(hào)hyelisakit關(guān)注上海恒遠(yuǎn)進(jìn)行了解！
