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2012-2-1 閱讀(1483)
培育細(xì)胞無菌操作
1. 無菌操作辦公地區(qū)范圍應(yīng)維持保潔及寬闊,*東西,例如玻璃管架、吸管、汲取器或吸管盒等可以短時間之內(nèi)安放,其他實驗用品用完即應(yīng)移出,以利于氣流之流通。實驗用品以70 ethanol 揩拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在臺面的中央無菌地區(qū)范圍,勿在邊緣的非無菌地區(qū)范圍培養(yǎng)箱KLYQ操作。
2. 實驗施行前,無菌室及無菌操作臺(laminar flow) 以紫外燈映射30-60 分鐘滅菌,以70 ethanol 揩拭無菌操作臺面,并開啟無菌操作颶風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10 分鐘后,才著手實驗操作。每每操作只處置一株細(xì)胞株,且縱然營養(yǎng)物質(zhì)相同亦不共享營養(yǎng)物質(zhì),以防止差錯淆惑或細(xì)胞間污染。實驗完結(jié)后,將實驗東西帶出辦公臺,以70 ethanol 揩拭無菌操作臺面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘以上后,運(yùn)用霉菌培養(yǎng)箱或二氧化碳培養(yǎng)箱再施行下一個細(xì)胞株的操作。
3. 謹(jǐn)慎取用無菌的實驗東西,防止導(dǎo)致污染。勿碰觸吸管尖頭部或器皿瓶口,亦不要在敞開的器皿正上方操作實驗。器皿敞開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾側(cè)約45° 角取用,盡力勿將瓶蓋蓋口朝上安放桌面兒。
4. 辦公擔(dān)任職務(wù)的人應(yīng)注意自身的安全,須穿戴實驗衣及手套兒后才施行實驗。對于來自人的總稱或是病毒感染的細(xì)胞株應(yīng)尤其謹(jǐn)慎操作,并挑選合適等級的無菌操作臺(至少Class II)。操作過程中,應(yīng)防止引動aerosol 的萌生,謹(jǐn)慎毒性藥品,例如DMSO 及TPA 等,并防止尖銳針頭的損害等。
5. 定期檢驗測定下面所開列項目: