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在人類迎戰(zhàn)疫情中，mRNA 疫苗的作用毋庸置疑，它有效預(yù)防和控制了病毒傳播。

mRNA 疫苗具有研發(fā)周期短、免疫原性強(qiáng)、對(duì)病原體變異反應(yīng)迅速和易于批量生產(chǎn)等諸多優(yōu)點(diǎn)。但在研發(fā)過程中，它也存在著業(yè)內(nèi)熟知的兩大技術(shù)難點(diǎn)：一是分子設(shè)計(jì)，二是遞送系統(tǒng)。

目前普遍采用脂質(zhì)納米粒 (LNP) 封裝 mRNA 疫苗的脆弱分子。LNP 封裝遞送靶向性強(qiáng)、包封率高、細(xì)胞親和性好，可以防止 mRNA 疫苗的脆弱分子在到達(dá)作用靶標(biāo)之前被消化或切碎。

※ 本文所展示的案例是通過高效薄層色譜技術(shù) (HPTLC)，對(duì)脂質(zhì)制劑配方組成進(jìn)行快速、簡便和穩(wěn)健的高通量分析檢測，可廣泛應(yīng)用于脂質(zhì)制劑的配方篩選以及質(zhì)量控制等研究。

陽離子脂質(zhì)體可與 mRNA 形成復(fù)合物，從而有效進(jìn)入細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染。通常的陽離子脂質(zhì)體處方中需含有陽離子脂質(zhì)、膽固醇、中性助磷脂以及 PEG 化磷脂等

案例中選擇了 DOPS、DOPE、DOTAP 等常用的輔助脂質(zhì)和陽離子脂質(zhì)作為對(duì)照品，來分析檢測脂質(zhì)制劑配方的成分組成。

以 mRNA 疫苗制劑中脂質(zhì)成分的分析為例，HPTLC 分析色譜圖結(jié)果如下所示：

注：樣品從左至右依次為 DOPS (二油?；字＝z氨酸)，lyso-DOPE (溶血-二油酰磷脂酰乙醇胺)，DOTAP (溴化三甲基-2, 3-二油酰氧基丙基銨)，DOPE (二油酰磷脂酰乙醇胺)，DOTMA (氯化三甲基-2, 3-二油烯氧基丙基銨)，DODMA (1,2-二油醇-3-二甲基氨基-丙烷)，油酸，膽固醇

應(yīng)用上述色譜條件對(duì)未知組成的制劑樣品進(jìn)行 HPTLC 分離，可根據(jù)色譜結(jié)果推測制劑配方組成。

軌道1：混合對(duì)照品，按照RF值遞增順序依次為 DOPS、DOPE、DODMA、膽固醇；

軌道2：脂質(zhì)體溶液；

軌道3：脂質(zhì)體制劑。

高效薄層色譜技術(shù) (HPTLC) 優(yōu)勢

● HPTLC 分析對(duì)樣品前處理要求低，薄層板一次性使用無污染風(fēng)險(xiǎn)，開放式色譜可自由衍生使脂質(zhì)檢測變得簡單且可視化。

● HPTLC PRO 分析 5 板約 4.5 小時(shí)，單個(gè)樣品分析平均耗時(shí)約 3.6 分鐘。

● ADC 2 分析 5 板約 7.5 小時(shí)，單個(gè)樣品分析平均耗時(shí)約 6 分鐘。

CAMAG HPTLC PRO

從以上分析，利用 CAMAG HPTLC PRO 全自動(dòng)色譜系統(tǒng)更能全面提升效率，實(shí)現(xiàn)全程無人干預(yù)的自動(dòng)化連續(xù)多板之 “點(diǎn)樣 – 展開 – 衍生 – 檢測 – 分析 – 報(bào)告" 操作流程，解決色譜重現(xiàn)性問題瓶頸，充分發(fā)揮 HPTLC 快速、直觀、自由衍生的技術(shù)優(yōu)勢，尤其適用于復(fù)雜成分樣品的分離及檢測。

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