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如何在熒光顯微鏡下拍攝微弱熒光圖像

閱讀：1893 發(fā)布時(shí)間：2012-6-18

通常在熒光顯微鏡下拍攝微弱的熒光影像是一個(gè)較大的問(wèn)題，也是迄今為止顯微鏡廠家和影像采集裝置制造者始終努力探求改善的一個(gè)重要內(nèi)容。同時(shí)，也不斷有新的裝置在出現(xiàn)。

那我們應(yīng)該怎樣做呢？

1）應(yīng)盡量完善的樣本的制備；

2）應(yīng)清洗干凈的樣品載體，如載玻片，蓋玻片等，以近一步消除不必要的雜熒光干擾；

3）應(yīng)盡量選取高質(zhì)量的熒光顯微鏡；

4）應(yīng)合理使用適合不同熒光光譜的熒光物鏡；

5）應(yīng)選取zui合適的激發(fā)光源；

6）應(yīng)選取高敏感度和大動(dòng)態(tài)范圍的CCD，也可用EMCCD等；

7）攝像頭的調(diào)整可適當(dāng)增加增益，但應(yīng)盡量避免產(chǎn)生因其引起的信噪比降低等問(wèn)題。建議可用過(guò)濾的方法近一步消除噪音信號(hào)；此外，在降低攝像頭的分辨率問(wèn)題上，很多使用者往往在拍攝熒光影像時(shí)，也會(huì)使用很高的分辨率，在通常情況下這是不常被推薦方法的。

8）可適當(dāng)增加曝光時(shí)間，同時(shí)也要注意時(shí)間延長(zhǎng)對(duì)熒光樣品的淬滅影響，建議可使用一些抗淬滅劑；

9）更應(yīng)注意降低拍攝環(huán)境的光線干擾，如背景光等，這也是非常值得注意的。

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