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            技術文章

            雞ELISA試劑盒試驗注意事項有哪些?

            閱讀:998          發(fā)布時間:2018-12-4

               或許,人生的每一次蛻變,都是觸目驚心的。曾經(jīng),我認為有些河流,我永遠趟不過去,有些山峰,我永遠不能翻越。不曾想,自己竟然是如此的勇敢?;蛟S,人生有太多或許了,上海恒遠的小編帶您了解雞ELISA試劑盒試驗注意事項有哪些?

            在ELISA實驗前的注意事項
             1、仔細閱讀說明書
             2、確定試劑盒在有效期內(nèi)
             3、按說明書確定所有試劑齊全(數(shù)量、體積)
             4、標本制備要規(guī)范,每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。短期
            內(nèi)無法實驗者,注意低溫保存

             5、準備好所有實驗額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機等

             6、根據(jù)檢測標本數(shù)量確定所需試劑的量
             7、按說明書將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑
             ELISA試驗時,注意事項如下:
             1.正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗

            結(jié)果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
             2.在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
             (1)固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。
            其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。

             (2)包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。

              上海恒遠致力于提供生命科學領域的技術服務,提供實驗技術服務,為廣大科研工作者大大節(jié)省了重復勞動的時間和精力,我們有過硬的技術咨詢和完善的售后服務,為您解決后顧之憂。

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