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ELISA實驗的結(jié)果判定
閱讀：5984 發(fā)布時間：2019-8-19臨床ELISA試劑盒測定按其表示測定結(jié)果的方式分為定性和定量測定兩大類。定性測定只是對標本中是否含有待測抗原或抗體作出“有”或“無”的結(jié)論，分別用“陽性”和“陰性”來表示。可見定性測定通常是用于傳染性病原體的抗原或抗體的測定，以判斷特定病原體感染的存在與否。而定量測定則是對標本中待測抗原的多少進行量值測定，以具體數(shù)值表示。定量測定基本上是用于非病原體抗原物質(zhì)的測定，如激素、細胞因子、腫瘤標志物、小分子藥物等。目前國內(nèi)在臨床上應(yīng)用的 ELISA試劑盒絕大部份是用于傳染性病原體的抗原或抗體的定性測定，也有少部份用于αFP、hCG、細胞因子等的定量測定。ELISA定性測定的“陽性”和“陽性”的判定依據(jù)是試劑盒所確定的陽性判定值（Cut-off）。定量測定的“量值”依據(jù)是試劑盒中所帶標準品同時測定得出的劑量反應(yīng)曲線（又稱標準曲線）。有關(guān)ELISA定性和定量測定結(jié)果的數(shù)據(jù)處理后面將有專門章節(jié)討論。本處只想強調(diào)的一點是，ELISA定性測定的“陰性”和“陽性”結(jié)果的判定依據(jù)只能是試劑盒本身所確定的Cut-off值，而不能以衛(wèi)生部臨床檢驗中心供應(yīng)弱陽性定值質(zhì)控血清。為什么要強調(diào)這一點呢？主要是因為以前有很多基層實驗室均使用衛(wèi)生部臨床檢驗中心供應(yīng)的弱陽性定值質(zhì)控血清（以前也稱“臨界值”血清）的測定吸光度來判定結(jié)果，高于其判為陽性，反之為陰性，而不管試劑盒Cut- off值為何。到目前為止，仍有一些實驗室在堅持這種錯誤的做法。試劑盒的Cut-off值的設(shè)立是建立在一系列科學(xué)試驗及統(tǒng)計學(xué)研究的基礎(chǔ)上的（詳見后述），而衛(wèi)生部臨床檢驗中心供應(yīng)的弱陽性定值質(zhì)控血清主要是供臨床實驗室進行室內(nèi)質(zhì)控時使用。
下面再解釋一下在ELISA定性測定結(jié)果判定中常用的一些縮寫。
（1）S/CO：其中S為Sample（樣本）或Specimen（標本）的簡寫，表示的是標本測定的吸光度值，CO為Cut-off值的簡寫。除競爭抑制法外，其它ELISA定性測定模式中，當S/CO值大于或等于1時，標本的測定為陽性，小于1時為陰性。
（2）S/N或P/N：其中S同（1），N為Negative（陰性對照）的簡寫，P為Patient（患者）的簡寫。較早的試劑盒很多都使用S/N或 P/N≥2.1為陽性判定標準，現(xiàn)仍有一些試劑盒使用這種方式。這種方式與S/CO方式無根本性區(qū)別，只不過是前者將陰性對照（N）的2.1倍視為Cut -off值而已。
九、結(jié)果報告及解釋
臨床ELISA測定結(jié)果的報告較為簡單。定性測定報陰性或陽性即可；定量測定則報出具體的數(shù)值。結(jié)果解釋比較起來要復(fù)雜的多，它要求實驗室技術(shù)人員對所測定的項目有較為全面的知識基礎(chǔ)。例如，對乙肝“兩對半”結(jié)果的解釋，不但要求檢驗者要知道不同的結(jié)果模式的臨床意義，而且必須對乙肝病毒的分子生物學(xué)、分子的變異及其對表型的影響有更深層次的了解?，F(xiàn)在，檢驗不再是單純的實驗室測定，而已成為一門臨床醫(yī)學(xué)學(xué)科，即檢驗醫(yī)學(xué)，這就要求從事醫(yī)學(xué)檢驗工作的檢驗醫(yī)師，對所做的測定項目除了知其然，還要知其所以然，否則就難免為時代所淘汰。
綜上所述，盡管ELISA測定的操作步驟非常簡單，但有可能會影響測定結(jié)果的因素卻較多，分布在測定操作的各步之中，尤以加樣、溫育和洗板為甚。