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            技術(shù)文章

            人超氧化物歧化酶試劑盒操作步驟

            閱讀:2044          發(fā)布時間:2011-10-19

            產(chǎn)品名稱:人超氧化物歧化酶試劑盒
            產(chǎn)品規(guī)格:96人份/48人份
            保存條件:2-8℃
            檢測方法:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
            經(jīng)營種類:進(jìn)口分裝和原裝
            檢測原理: 采用雙抗體夾心ABC-ELISA法
            產(chǎn)品用途:For laboratory use only,Not for drug or other uses.本公司可提供免費代測服務(wù).
            公司名稱:上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司

            聯(lián) 系 人:楊
            公司:http://www.shhyswsj.com

            檢測范圍:                                             

            5U/mL -150U/mL  

            人超氧化物歧化酶試劑盒操作步驟

            1.         標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為120U/mL,80U/mL 40U/mL20U/mL, 10U/mL)。

            2.         加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

            3.         溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

            4.         配液:將3048T20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水3048T20倍)倍稀釋后備用。

            5.         洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

            6.         加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

            7.         溫育:操作同3。

            8.         洗滌:操作同5。

            9.         顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

            10.     終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

            11.     測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。                                  

            試劑盒性能:

            1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.92以上。

            2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%15%                           

            保存條件及有效期:

            1.試劑盒保存:2-8

            2.有效期:6個月

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