化工儀器網(wǎng)
公司動(dòng)態(tài)
恒遠(yuǎn)介紹：使用動(dòng)物血清來培養(yǎng)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)方法
閱讀：930 發(fā)布時(shí)間：2014-5-15 今天就是本月的中旬標(biāo)記啦，點(diǎn)擊我公司的資訊動(dòng)態(tài)中回顧一下能夠看到，在這半個(gè)月以來，上海恒遠(yuǎn)主要給朋友們介紹到了動(dòng)物血清、中檢所標(biāo)準(zhǔn)品、酶聯(lián)免疫試劑盒，這三種產(chǎn)品也是我公司的主營產(chǎn)品。下面就來看看我們今天的主要內(nèi)容吧，血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)方法之貼塊法，我們就主要來看看貼塊法。
動(dòng)物經(jīng)頸動(dòng)脈放血后，在無菌操作下迅速取出胸腹主動(dòng)脈段，置于含Hank'；s液的平皿中漂洗3次，將凝塊洗干凈后剝除外膜的纖維脂肪層，然后縱行切開血管，刮除內(nèi)膜即內(nèi)皮細(xì)胞迅速撕下中膜內(nèi)、中層，切成約1mm寬的小條，浸泡在含血清的Hank'；s液中，并將撕下小組織塊種植于培養(yǎng)瓶壁。置于37℃恒溫箱，2h左右，取出培養(yǎng)瓶加入20%動(dòng)物血清的培養(yǎng)液，再放回培養(yǎng)箱內(nèi)靜止培養(yǎng)4天。4天后可見細(xì)胞從組織中遷移游出。
不同動(dòng)物血管結(jié)構(gòu)有差異，豬和猴較易操作，但小動(dòng)物如兔、鼠因其血管小，血管壁薄等特點(diǎn)，使之難以分離。另外組織塊太薄，不易粘附培養(yǎng)基，也使細(xì)胞較難生長。
那么我們要怎樣去避免培養(yǎng)不成功呢？上海恒遠(yuǎn)生物建議您在本次實(shí)驗(yàn)中需要注意：
1、種植組織塊的數(shù)目，如75cm2的長頸瓶組織塊不得少于30 ；
2、根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的種屬加入適量的不同血清，一般可加入胎牛血清，若小牛血清增殖效果差，應(yīng)加胎牛血清（我公司是專業(yè)代理GIBCO、NQBB胎牛血清的供應(yīng)商，代理，提供全程技術(shù)指導(dǎo)），通常濃度為10%～20%；
3、培養(yǎng)基的選擇：常用的有DMEM，M199培養(yǎng)基。培養(yǎng)兔的平滑肌細(xì)胞用DMEM效果較好。
以上就是使用動(dòng)物血清來培養(yǎng)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)方法了，上海恒遠(yuǎn)產(chǎn)品優(yōu)勢：*、完善、穩(wěn)定，提供全程實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)。