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    一、添加劑的添加
    1.溫度的掌握：卵黃和抗生素類添加的溫度都不應(yīng)太高。
    2.定量：過多會抑制一些目標(biāo)菌，太少又導(dǎo)致雜菌的過度生長。

    二、培養(yǎng)溫度的掌握
    1.真菌類：25-28℃培養(yǎng)
    2.細(xì)菌類：李氏菌在增菌和生化中要求培養(yǎng)溫度在30℃左右。
    3.其他一般在36℃左右

    三、接種方法
    常用的方法主要有劃線、三點接種、穿刺接種、傾注接種、涂布接種、液體接種。

    四、革蘭氏染色方法
    染色時間的掌握、沖洗的方法

    五、劃線獲得單個菌落的方法，劃不出單個菌落的原因
    1.平板上有過多的水分；
    2.劃線時接種環(huán)未經(jīng)反復(fù)灼燒。
    3.多區(qū)劃線，三區(qū)或四區(qū)劃線。

    六、涂布和傾注的區(qū)別
    1.涂布利于觀察，但由于涂布棒上會帶有少量的菌液，影響計數(shù)的準(zhǔn)確性。
    2.涂布更為準(zhǔn)確，但不利于觀察菌落的狀態(tài)。

    七、培養(yǎng)基配制時應(yīng)注意的問題
    1.滅菌溫度要嚴(yán)格控制，按照要求滅菌，尤其含糖量較高的培養(yǎng)基溫度不應(yīng)太高，過高會導(dǎo)致糖分焦化，影響質(zhì)量。
    2.瓊脂培養(yǎng)基不能反復(fù)溶化。反復(fù)溶化會破壞培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分。
    3.培養(yǎng)基不能反復(fù)滅菌，反復(fù)滅菌也會導(dǎo)致營養(yǎng)成分的破壞。
    4.含瓊脂的培養(yǎng)基滅菌后，要搖勻。

    八、板的保存
    大多數(shù)平板如VRBA、DC、尿素酶生化管、顯色系列等要避光低溫保存。

    九、產(chǎn)品的保存
    1.干粉培養(yǎng)基：避光干燥，結(jié)塊后不能使用。
    2.亞碲酸鉀卵黃增菌液、50%卵黃乳液等：冷凍保存，使用時，要常溫解凍，避免水浴加熱。
    3.抗生素類：冷藏保存，溫度過高會導(dǎo)致靈敏度的下降。
    4.兔血漿：冷藏保存少量的紅色不會影響結(jié)果。

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