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ELISA實(shí)驗(yàn)加樣防錯(cuò)小竅門
閱讀：1795 發(fā)布時(shí)間：2019-4-2上海恒遠(yuǎn)是一家生產(chǎn)和銷售科學(xué)研發(fā)用試劑產(chǎn)品公司，領(lǐng)域涵蓋化學(xué)、分析化學(xué)、生命科學(xué)和材料科學(xué)等基礎(chǔ)創(chuàng)新領(lǐng)域，助力客戶的研究計(jì)劃，在廣大科研用戶的幫助和支持下，經(jīng)過(guò)不懈的努力，以過(guò)硬的產(chǎn)品質(zhì)量和好的服務(wù)態(tài)度，為客戶提供一個(gè)穩(wěn)定平臺(tái)，成為客戶可信賴的長(zhǎng)期合作伙伴。
ELISA加樣時(shí)的防錯(cuò)小竅門
（1）用一張寫滿字的紙，字越多越好，比如報(bào)紙，墊在下面，這樣，加過(guò)標(biāo)本的小孔看過(guò)去下面的字會(huì)變小，沒(méi)加的字正常，非常容易區(qū)分。
（2）可以利用液面反光與沒(méi)有加的孔加以區(qū)別。
（3）在標(biāo)本加完后，再把加樣槍全壓下，使液面產(chǎn)生小氣泡，也可以加以區(qū)分。
實(shí)驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題解析
問(wèn)：做間接Elisa法測(cè)試小鼠血清中的IgE抗體，設(shè)空白對(duì)照、和陰性對(duì)照、陽(yáng)性血清稀釋倍數(shù)為5千、1萬(wàn)、10萬(wàn)、20萬(wàn)不等，用的是生物素標(biāo)記的羊抗鼠IgE抗體，和親和素的辣根過(guò)氧化物酶?？墒墙Y(jié)果除了空白對(duì)照孔沒(méi)有顏色外，其余各孔全有顏色，而且OD值都相差不大，為什么？
答：可能原因如下：
（1） 水質(zhì)被金屬離子等污染；防止辦法盡量使用新鮮水或蒸餾水。
（2） 洗滌不充分，樣品中其它成分殘留或酶殘留；防止辦法洗滌液應(yīng)注滿微孔，充分洗滌。
（3） 移液頭重復(fù)使用，未洗凈或消毒不*； 防止辦法移液頭一次性使用。
（4） 酶標(biāo)板靈敏度過(guò)高。
（5） 一抗顯色時(shí)間的控制等等，關(guān)于ELISA的每一步都要注意才行。
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