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            技術文章

            人谷氨酸脫羧酶試劑盒實驗原理

            閱讀:1202          發(fā)布時間:2013-4-19

            人谷氨酸脫羧酶試劑盒實驗原理
            本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人谷氨酸脫羧酶(GAD)水平。用純化的人谷氨酸脫羧酶(GAD)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入谷氨酸脫羧酶(GAD),再與HRP標記的谷氨酸脫羧酶(GAD)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的谷氨酸脫羧酶(GAD)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人谷氨酸脫羧酶(GAD)濃度。

            人谷氨酸脫羧酶試劑盒注意事項:
            1
             試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
            2
             濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
            3
             各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
            4
             請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
            5
             封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
            6
             底物請避光保存。
            7
             嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
            8
             所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
            9
             本試劑不同批號組分不得混用。
            10. 
            如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

             

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