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Elisa操作問題及方法解決方案（歡迎下載）
閱讀：1165 發(fā)布時間：2015-5-19| 提 供 商 | 上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司 | 資料大小 | 3.7KB |
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| 資料類型 | JPG 圖片 | 瀏覽次數(shù) | 1165次 |
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操作過程中可能出現(xiàn)的問題和解決方法 | ||
問題 | 可能原因 | 解決方法 |
顯色淡，靈敏度偏低 | 1、試劑盒在運(yùn)輸途中時間太長，溫度太高 | 盡量縮短運(yùn)輸時間，夏季應(yīng)放冰塊降溫 |
2、試劑盒未充分平衡 | 試劑盒從2～8℃冰箱取出后打開盒蓋，于室溫平衡至少20分鐘，確保所有試劑已平衡至室溫（約25℃）。 | |
3、培養(yǎng)箱溫度不足37℃ | 注意培養(yǎng)箱溫度，放入反應(yīng)板后盡量減少開啟次數(shù)以免影響溫度恒定，非隔水式培養(yǎng)箱尤其應(yīng)注意 | |
4、保溫時間不足 | 校正定時鐘準(zhǔn)確定時 | |
5、洗滌時沖擊力太大、浸泡時間過長、洗滌次數(shù)增加 | 按說明書要求保留洗滌時間，準(zhǔn)確記住洗滌次數(shù) | |
6、移液器吸液量不足，吸嘴內(nèi)壁掛水太多或內(nèi)壁不清潔 | 校正移液器，吸嘴要配套，裝吸嘴時要緊密，吸嘴內(nèi)壁要清潔，一次性使用 | |
7、蒸餾水水質(zhì)有問題 | 使用新鮮合格的蒸餾水 | |
8、底物作用時間不足 | 準(zhǔn)確定時 | |
背景深，全部呈有色 | 1、洗滌不充分，洗后未拍干，樣品中其它成分殘留或酶標(biāo)記物殘留 | 濃縮洗液準(zhǔn)確配制；10倍濃縮洗滌液如有結(jié)晶則應(yīng)讓結(jié)晶于室溫全部溶解后再量取稀釋；充分洗滌，*拍干。加樣或加酶拍板的濾紙應(yīng)棄去不用，不要反復(fù)使用，否則易造成污染 |
2、樣品污染 | 樣品應(yīng)新鮮采集，或低溫保存，防止污染 | |
3、培養(yǎng)箱溫度超過37℃或反應(yīng)時間過長 | 調(diào)整培養(yǎng)箱溫度，準(zhǔn)確定時 | |
4、吸嘴重復(fù)使用，未洗凈或消毒不* | 吸嘴盡可能一次性使用 | |
5、蒸餾水被污染 | 使用新鮮蒸餾水 | |
6、酶等試劑混用 | 不同批號試劑勿混用 | |
7、一次實(shí)驗(yàn)的標(biāo)本量過多，加樣時間太長，導(dǎo)致實(shí)際反應(yīng)時間延長 | 合理安排實(shí)驗(yàn)，避免幾塊酶標(biāo)板同時加樣 | |
重復(fù)性不佳 | 1、樣品數(shù)量多少不一，加樣時間有長有短 | 重復(fù)某一樣品時，加樣時間盡可能與*次接近 |
2、保溫時間不一致，洗滌條件不一致，操作人員不一致 | 重復(fù)測定標(biāo)本，操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致，以排除這些因素造成的不一致的可能性 | |
3、加樣量不一致 | 樣品稀釋前應(yīng)充分混勻，盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴 | |
出現(xiàn)白板,陽性對照不顯色 | 顯色液變質(zhì) | 更換新的顯色液 |
洗滌液配制有誤 | 請按說明書所示稀釋倍數(shù)配制 | |
未加酶結(jié)合物而認(rèn)為已加入 | 注意不要漏加 | |
終止液誤作洗滌液稀釋或當(dāng)?shù)孜镆菏褂?/span> | 每次加液前均應(yīng)看清標(biāo)簽 | |