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            恒遠(yuǎn)產(chǎn)品文獻(xiàn):E2免疫試劑盒

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            補(bǔ)腎更年方對去除卵巢大鼠血清 E2 水平及下丘腦 ERα 蛋白表達(dá)的影響
            張?zhí)m1 邰迎春1 王淵2 侯淑紅1** 雷莉妍2
            ( 1. 陜西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院,陜西 咸陽 712000; 2. 陜西中醫(yī)藥大學(xué),陜西 咸陽 712046)

            摘 要: 目的 治療補(bǔ)腎更年方對去除卵巢大鼠血清 E2 水平和下丘腦 ERα 蛋白表達(dá)的影響,探討其效應(yīng)機(jī)制。方法 將 40 只大鼠用手術(shù)去除卵巢后隨機(jī)分為補(bǔ)腎更年方大劑量組、中劑量組、小劑量組和己烯雌酚組,并與 10 只模型組和 10 只空白組做對照,補(bǔ)腎更年方大、中、小劑量組以不同劑量灌胃,模型組和空白組以生理鹽水灌胃,己烯雌酚組以己烯雌酚按 1mL/100g 的劑量灌胃,連續(xù) 45 d,結(jié)束后,取血,放免法檢測血清 E2,Westernblot 法檢測大鼠下丘腦 ERα 蛋白表達(dá)。結(jié)果 與空白組比較,模型組大鼠血清 E2 水平顯著降低、下丘腦 ERα 蛋白表達(dá)顯著減少( P < 0. 01) ; 與模型組比較,補(bǔ)腎更年方大、中劑量組和己烯雌酚組能夠顯著升高大鼠血清 E2水平并增加下丘腦 ERα 蛋白表達(dá)( P < 0. 05) ,補(bǔ)腎更年方小劑量組對其無明顯影響( P > 0. 05) 。

            結(jié)論 補(bǔ)腎更年方在改善去除卵巢大鼠血清 E2 水平同時,可能通過影響 ERα 蛋白的表達(dá),提高 ER 的生物效應(yīng),從而發(fā)揮對更年期綜合征的治療效應(yīng)。
            關(guān)鍵詞: 去除卵巢大鼠; 補(bǔ)腎更年方; E2 ; ERα
            中圖分類號: R271. 11 + 2

            文獻(xiàn)標(biāo)識碼: A

            更年期綜合征( menopausal syndrome,MPS) 是一種以植物神經(jīng)功能紊亂為主要表現(xiàn)伴有神經(jīng)心理癥狀的婦科常見癥候群,對婦女的工作、生活以及身心健康產(chǎn)生了較為嚴(yán)重的影響[1]。由于現(xiàn)代社會人們生活方式的改變、身心壓力的與日俱增以及人口老齡化結(jié)構(gòu)的形成,本病發(fā)病率逐年上升且發(fā)病年齡較以往提前[2 - 3]。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為,腎虛為本病根本病機(jī),有鑒于此,我們以滋陰降火為治法,自擬補(bǔ)腎更年方,在臨床取得了良好療效。本研究擬治療補(bǔ)腎更年方對去除卵巢所致更年期綜合征大鼠血清雌二醇( E2 ) 水平和下丘腦雌激素受體 α( ERα) 蛋白表達(dá)的影響,以期進(jìn)一步明確其作用機(jī)制。
            1 材料和方法
            1. 1 藥物與試劑 補(bǔ)腎更年方( 熟地黃 15 g,地骨皮 12 g,山藥 10 g,知母 10 g,黃柏 10 g,白芍15 g,酸棗仁 15 g,yin羊藿 10 g,炙甘草 6 g) ,中藥飲片由陜西中醫(yī)中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院中藥房提供; 己烯雌酚片( 規(guī)格: 0. 5 g /片) ,天津力生制藥股份有限公司,國藥準(zhǔn)字 H12020154; 兔抗鼠 ERα 蛋白抗體,兔抗鼠 GAPDH 抗體,Santa Cruz 公司; E2 免疫試劑盒,上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司。
            1. 2 實驗動物 SD 大鼠,雌性,2 ~ 3 月齡,體質(zhì)量 250 ± 20g,西安交通大學(xué)動物實驗中心,動物合格證號: SCXK( 陜) 2016 - 015 號。
            1. 3 主要儀器設(shè)備 離心機(jī)( 廣州儀科實驗室技術(shù)有限公司) ; 凝膠成像分析系統(tǒng)( BIO - RAD 公
            司) ,Image - proplus 6. 0 圖像分析系統(tǒng)( Media Cybernetics 公司) ; γ - 911 全自動放免計數(shù)儀( 中國科技大學(xué)實業(yè)總公司) 。
            1. 4 分組、模型組大鼠制備方法 將大鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、西藥組、補(bǔ)腎更年方大劑量組、中劑量組、小劑量組共 6 組,每組 10 只。模型組大鼠即 去 除 卵 巢 大 鼠,采 用 10 % 水 合 氯 醛,以300 mg /kg的劑量通過腹腔注射將大鼠麻醉后,將其進(jìn)行仰臥位固定,對其下腹部進(jìn)行備皮消毒,切口部位定位于下腹部陰道口上方 2 cm 處,對此處進(jìn)行正中切口,長度為 1cm,再將腹壁進(jìn)行逐層切開,暴露雙側(cè)卵巢并在其下方進(jìn)行結(jié)扎,將其切除,用青霉素對此部位進(jìn)行沖洗,后將腹壁肌層和皮膚連續(xù)縫合[4]。

            1. 5 空白組大鼠制備方法 即假手術(shù)組,麻醉、體位、切口、消毒、縫合同模型大鼠制備方法,但不切除卵巢,而是將卵巢周圍少量脂肪組織清除。
            1. 6 各組干預(yù)方式 對于補(bǔ)腎更年方組,將補(bǔ)腎更年方各組成藥物,煎煮 濃 縮 成 湯 劑,大 劑 量 組 按1. 5mL/100g、中 劑 量 組 按 1mL/100g、小 劑 量 組 按0. 5mL/100g,對大鼠進(jìn)行灌胃; 對于西藥組,將己烯雌酚片用蒸餾水制成含有己烯雌酚 0. 01 mg /mL 的溶液,按1mL/100g 的劑量對大鼠進(jìn)行灌胃; 對于空白組和模型組,均在每日同一時段進(jìn)行同種程度抓取,采用生理鹽水,按 1mL/100g 的劑量對大鼠進(jìn)行灌胃。上述6 組均進(jìn)行每日1 次的干預(yù),連續(xù)治療45d。

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