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            上海研謹生物科技有限公司

            當前位置:上海研謹生物科技有限公司>>細胞分離液>>分離液試劑盒>> ISC2011G豚鼠胰島細胞分離液試劑盒

            豚鼠胰島細胞分離液試劑盒

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            訂  貨  量: ≥1 

            具體成交價以合同協(xié)議為準

            產品型號ISC2011G

            品牌

            廠商性質生產商

            所在地上海市

            更新時間:2025-02-17 13:34:07瀏覽次數(shù):1152次

            聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網
            本品用于分離豚鼠胰島細胞
            Store at: RT° C Size :2X100ml/kit試劑盒內容
            試劑:全血及組織稀釋液 100ml
            試劑:細胞洗滌液 100ml
            試劑B: 100ml
            試劑D: 100ml
            說明書 1份

            操作說明 細胞分離液試劑盒操作說明::::

            Store at:::RT 試劑盒規(guī)格::::2×100ml/Kit

            豚鼠胰島細胞分離液試劑盒試劑盒內容:

            貨號                     品牌              產品名稱          規(guī)格         報價

            單個核細胞分離液    
            LDS1075TBD人全血單個核細胞分離液(FICOLL配置)200ml400
            LDS1075PTBD人臟器組織單個核細胞分離液(FICOLL配置)100ml400
            LDS1075ZTBD人腫瘤浸潤組織單個核細胞分離液100ml400
            LDS1080TBD大鼠全血單個核細胞分離液200ml400
            LDS1080PTBD大鼠臟器組織單個核細胞分離液100ml400
            LDS1080ZTBD大鼠腫瘤浸潤組織單個核細胞分離液100ml400
            LDS1090TBD小鼠全血單個核細胞分離液200ml400
            LDS1090PTBD小鼠臟器組織單個核細胞分離液100ml400
            LDS1090ZTBD小鼠腫瘤浸潤組織單個核細胞分離液100ml400
            LDS1094TBD兔外周血單個核細胞分離液200ml400
            LDS1094PTBD兔臟器組織單個核細胞分離液100ml400
            LDS1094ZTBD兔腫瘤浸潤組織單個核細胞分離液100ml400
            LDS1077TBD狗外周血單個核細胞分離液200ml400
            LDS1077PTBD狗臟器組織單個核細胞分離液100ml400
            LDS1077ZTBD狗腫瘤浸潤組織單個核細胞分離液100ml400
            LDS1084TBD牛外周血單個核細胞分離液200ml400
            LDS1084PTBD牛臟器組織單個核細胞分離液100ml400
            LDS1084ZTBD牛腫瘤浸潤組織單個核細胞分離液100ml400
            LDS1083TBD豚鼠外周血單個核細胞分離液200ml400

            全血及組織稀釋液 100ml

            細胞洗滌液 100ml

            試劑 B 100ml

            試劑 D 100ml

            說明書 1

            一、、、、分離方法說明及圖例

            A. 10ml 15ml 玻璃離心管中依次小心加入 B、D 兩種液體各 2ml,制成梯度界面(各液面分層一定要清晰);

            B.取 1ml新鮮抗凝血與全血及組織稀釋液(Cat#2010C111911混合并小心加于D液之液面上;或取組織勻漿單細胞懸液(細胞濃度為2×108-1×109/ml,具體制備方法參照

            “二、組織單細胞懸液的制備”)小心加于D液之液面上;

            C. 400g(約1500/分)離心15分鐘(半徑15cm水平轉子);

            此時離心管中由上至下細胞分為五層。*層;為血漿層或組織勻漿液層。第二層;為

            富含胰島細胞的 D 液層。。。。第三層;為單個核細胞層。第四層;為透明 B 液層。第五層;為紅細胞層。收集第二層富含胰島細胞的 富含胰島細胞的 富含胰島細胞的 D 液層放入含 4-5ml 細胞洗滌液(Cat#2010X1118)的試管中,充分混勻后,以 500g(約 1800 /分)離心 20 分鐘,棄去上清留沉淀細胞重新懸起。重復洗滌 2 次即得所需胰島細胞。

            注::::A. 提取率約為 80%

            注::::A.. .. 本說明只提供機械勻漿制備單細胞懸液的方法 本說明只提供機械勻漿制備單細胞懸液的方法 本說明只提供機械勻漿制備單細胞懸液的方法,,,,酶消化法由于各實驗室選取的消化 酶消化法由于各實驗室選取的消化酶種類各不相同, 酶種類各不相同,,,請各實驗室自行選擇進行試驗 請各實驗室自行選擇進行試驗 請各實驗室自行選擇進行試驗。。。。全過程及所需試劑要求無菌環(huán)境 全過程及所需試劑要求無菌環(huán)境 全過程及所需試劑要求無菌環(huán)境。。。。 剪碎法::::將組織塊放入平皿后,加入少量組織勻漿液及 20%胎牛血清;用眼科剪將組織剪至勻漿狀,加入 5ml 組織勻漿液及 20%胎牛血清;用吸管吸取組織勻漿,用 100 目不銹鋼濾網

            (另購)過濾到試管內;離心沉淀 1500/分×3 min,再用細胞洗滌液清洗 3次,每次以 500rpm短時低速離心除去細胞碎片,以 200 目不銹鋼濾網(另購)過濾去細胞團塊。作細胞計數(shù)并調整細胞濃度為(25)×107/ml。常溫下放置, 待測細胞的活力。分離前用 20%胎牛血清或全血及組織稀釋液懸起細胞濃度為 2×108-1×109/ml 的單細胞懸液備用。

            勻漿器法:用眼科剪將組織剪成小塊;放入 70ml 組織研磨器內,加入 2ml 組織勻漿液及 20% 勻漿器法胎牛血清;緩慢轉動研棒,研磨至勻漿;用 5ml 組織勻漿液及 20%胎牛血清沖洗研器;收集細胞懸液,經 200 目不銹鋼濾網(另購)過濾;離心沉淀 800rpm×2min ,再用細胞洗滌液洗 3 次,離心沉淀。作細胞計數(shù)并調整細胞濃度為(25)×107/ml。常溫下放置, 待測細胞的活力。分離前用 20%胎牛血清或全血及組織稀釋液懸起細胞濃度為 2×108-1×109 /ml 的單細胞懸液備用。 細胞計數(shù)方法: 細胞計數(shù)法是用來計數(shù)細胞懸液中細胞數(shù)量的一種方法。一般利用計數(shù)板(血球計數(shù)板)進行。既可用于分離(散)細胞培養(yǎng)接種前計數(shù)所制備的細胞懸液中的細胞數(shù)量,也可用于

            對培養(yǎng)物的細胞數(shù)量進行計數(shù)。不論計數(shù)的對象如何,均須制備分散的細胞懸液。

            1)、在細胞計數(shù)板中央放置計數(shù)的蓋玻片。

            2)、用玻璃虹吸管吸取細胞,讓虹吸管在蓋玻片上或下側的計數(shù)板凹蹧處流出懸液,至

            蓋玻片被液體充滿為止。

            3)、置顯微鏡下計數(shù)四角大方格內的細胞總數(shù)。對于壓線的細胞只計數(shù)在上線和左線者,

            對于細胞團按單個細胞計數(shù)。

            4)、按下式計數(shù)細胞懸液的密度:

            細胞密度=(4 個大格細胞總數(shù)/4)×104/ml×稀釋倍數(shù)

            公式中乘以 104因為計數(shù)板中每一個大格的體積為:

            1.0mm(長)×1.0mm(寬)×0.1mm(高)=0.1mm3

              1ml1000mm3

            細胞計數(shù)要點::::

            A 進行細胞計數(shù)時,要求懸液中細胞數(shù)目不低于 104/ml,如果細胞數(shù)目很少要進行離

            心再懸浮于少量培養(yǎng)液中;顯微鏡下計數(shù)時,遇到 2 個以上細胞組成的細胞團,應按單個細胞計算。如果細胞團>10%,說明細胞分散不充分; 或細胞數(shù)<200 /10mm2>500 /10 mm2 時,說明稀釋不當,需重新制備細胞懸液。

            B 要求細胞懸液中的細胞分散良好,否則影響計數(shù)準確性。

            C 取樣前充分混勻細胞懸液,尤其多次取樣更要注意每次取樣都要混勻,以求計數(shù)準確;

            D 數(shù)細胞的原則是只數(shù)完整的細胞,若細胞聚集成團時,只按照一個細胞計算。如果細

            胞壓在格線上時,則只計上線,不計下線,只計左線,不計右線。

            E 操作時,注意蓋玻片下不能有氣泡,也不能讓懸液流入旁邊槽中,否則要重新計數(shù)。

            初學者易犯的錯誤: 初學者易犯的錯誤:::

            A 計數(shù)前未將待測懸液吹打均勻。

            B 滴入細胞懸液時蓋玻片下出現(xiàn)氣泡。

            C 滴入懸液時的量太多,至使細胞懸液流入旁邊的槽中。

            三、、、、注意事項

            A 本分離液是敏光型的,運輸和貯藏過程中在 18-25避光保存,啟封后 4保存本品只能用于科學研究,不能用于臨床檢測

            避免微生物污染。本品為真空包裝,未啟封前于 10 以下易出現(xiàn)白色結晶,影響分離效果。

            B 待分離的血液及組織樣本要求新鮮,避免冷凍和冷藏。分離液和所分離樣本一定在

            20水浴箱中復溫 20 分鐘保證分離液和所分離樣本溫度在 20±2時分離效果,且

            所有操作過程一定要在無菌條件下進行。

            C 由于各品牌離心機的性能不同,國內南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季差異,可能影響分離

            效果,用戶可調節(jié)離心轉數(shù)及離心時間,摸索*的分離條件(具體分離條件各實驗室自定)。

            D 使用無靜電反應的離心管,推薦使用未經過堿處理的玻璃離心管。

            E *抗凝劑選擇:EDTA、枸櫞酸、肝素。注意在血液稀釋過程中應去除抗凝劑體積。

            F 分離過程中所用其他試劑如:羥乙一基淀粉 550、全血及組織稀釋液、細胞洗滌液及

            紅細胞裂解液等以我公司產品為*選擇,本公司相關系列產品無菌、無病毒、無支原體、

            低內毒素水平且無細胞毒性,所獲得的細胞可保持完好的生物活性和完整的細胞形態(tài)。

            四、、、、 產品性能指標

            pH 7.0-7.5

            滲透壓 280-340mOsmol/kg

            內毒素 0.5...EU/ml

            無菌 直接接種培養(yǎng) 14 天后培養(yǎng)基澄清

            澄明度及不溶性顆粒物 50ml 溶液中含 10μm 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 20 粒以下含 25μm 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 5 粒以下

            五、、、、 貯藏及保存期限 貯藏及保存期限 貯藏及保存期限

            18-25避光保存,有效期兩年。啟封后置 4保存,有效期一周。

            注::::若保證無微生物污染,啟封后可置 4長期保存。但應注意保存溫度較低時本分離液易出現(xiàn)白色結晶,影響分離效果。

             

            細胞洗滌液

            細胞洗滌液價格合理,質量有保障,歡迎選購!

            全血及組織勻漿稀釋液

            全血及組織勻漿稀釋液價格合理,質量有保障,歡迎選購!

            羊血管內皮細胞分離液試劑盒

            本品用于分離羊血管內皮細胞$r$n Store at: RT° C

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