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            上海寶葉生物科技有限公司

            中級(jí)會(huì)員·6年

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            中級(jí)會(huì)員·6年
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            蔣先生
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            DNA限制酶分析與切割

            2013-2-21  閱讀(1178)

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            儀器用具:
            37℃及65℃水浴或恒溫槽

            藥品試劑:
            質(zhì)體pBluescript II SK (-)
            限制酶:BamHI, PvuII 及ScaI (濃度均為10 units/μL, Invitrogen)
            10×Reaction buffer 6 (0.5 M Tris-HCl, pH 7.4; 60 mM MgCl2; 0.5 M NaCl; 0.5 M KCl)
            無菌水

            方法步驟:
            1) 取7 支微量離心管,依下表所列體積 (單位 μL) 依序加于管壁不同位置上。

            ◆ 每次吸取限制酶時(shí),請(qǐng)換一支新的微量移液器頭以免造成污染。
            總體積為20 μL,短暫離心后,以微量移液器頭輕輕混合,#1 置冰浴中,其余各管置于37℃反應(yīng)1 h。
            2) 置65℃水浴15 min 中止反應(yīng)后,移置冰浴冷卻,即可進(jìn)行電泳分析。

             

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