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組蛋白脫乙酰酶（HDAC1）檢測試劑盒使用說明書
閱讀：291 發(fā)布時(shí)間：2016-12-5| 提 供 商 | 上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 | 資料大小 | 17.3KB |
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組蛋白脫乙酰酶(HDAC1)檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)原理：
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠叉頭蛋白P3（FOXP3）水平。用純化的小鼠叉頭蛋白P3（FOXP3）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入叉頭蛋白P3（FOXP3），再與HRP標(biāo)記的叉頭蛋白P3（FOXP3）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的叉頭蛋白P3（FOXP3）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠叉頭蛋白P3（FOXP3）濃度。
組蛋白脫乙酰酶(HDAC1)檢測試劑盒樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
氯化鎘 (2.5水) 英文名(EN)： Cadmium Chloride Hemi(Pentahydrate) (... CAS No.： 7790-78-5 規(guī)格(SP)： 100G 類別(Key)： 通用試劑
麥汁瓊脂 英文名(EN)： Wort Agar CAS No.： Null 規(guī)格(SP)： 500G 類別(Key)： 通用試劑
DL-炔丙基甘氨酸 英文名(EN)： DL-Propargylglycine CAS No.： 64165-64-6 規(guī)格(SP)： 250MG原裝 類別(Key)： 通用試劑
馬尿酰-組氨酰-亮氨酰 英文名(EN)： N-Hippuryl-His-Leu Hydrate (≥98%,HPLC) CAS No.： 207386-83-2 規(guī)格(SP)： 25MG 類別(Key)： 通用試劑
D-纖維二糖 英文名(EN)： D-(+)-Cellobiose (≥99.0%,TLC) CAS No.： 528-50-7 規(guī)格(SP)： 5G 類別(Key)： 通用試劑
蜜二糖 英文名(EN)： D-(+)-Melibiose (≥99.0%) CAS No.： 585-99-9 規(guī)格(SP)： 1G 類別(Key)： 通用試劑
檸檬苦素 英文名(EN)： Limonin (>90%,HPLC) CAS No.： 1180-71-8 規(guī)格(SP)： 1MG 類別(Key)： 通用試劑
25-羥膽固醇 英文名(EN)： 25-Hydroxycholesterol (≥98%) CAS No.： 2140-46-7 規(guī)格(SP)： 10MG 類別(Key)： 通用試劑
氫氧化銫 英文名(EN)： Cesium Hydroxide Hydrate (≥90%) CAS No.： 12260-45-6 規(guī)格(SP)： 5G 類別(Key)： 通用試劑
TMB 二鹽酸鹽 英文名(EN)： TMB dihydrochloride (≥98%) CAS No.： 207738-08-7 規(guī)格(SP)： 250MG 類別(Key)： 通用試劑
甲酸 英文名(EN)： Formic Acid (98%) CAS No.： 64-18-6 規(guī)格(SP)： 100ML 類別(Key)： 通用試劑
七水硫酸鋅 英文名(EN)： Zinc Sulfate Heptahydrate (≥99.0%) CAS No.： 7446-20-0 規(guī)格(SP)： 100G 類別(Key)： 通用試劑
組蛋白脫乙酰酶(HDAC1)檢測試劑盒