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            免費代測人激活素(Activin) ELISA 檢測試劑盒

            閱讀:302          發(fā)布時間:2012-11-13
            提 供 商 上海撫生實業(yè)有限公司 資料大小 3.1KB
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            資料類型 JPG 圖片 瀏覽次數(shù) 302次
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            人激活素  (Activin) ELISA 檢測試劑盒
            本試劑僅供研究使用      標本:血清或血漿
             
            我公司作為國家重點實驗室及國內各大院校長期供應商,品種齊全,質量保證,名廠。本公司品質優(yōu)良,受到廣大科研工作者的一致肯定和贊許。期待您的來電。
            :陳進
             :86- / 31255782
            /
            86-
            :www.shfsbio.com
            試驗原理:
            Activin試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知Activin濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將Activin和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中Activin的濃度呈比例關系。
             
            人激活素  (Activin) ELISA 檢測試劑盒試劑盒內容及其配制
            試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制
            96/48人份酶標板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型
            塑料膜板蓋1塊半塊即用型
            標準品:8.0ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進行稀稀
            空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型
            標準品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型
            生物素標記的抗Activin抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型
            親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型
            洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進行稀釋
            底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型
            底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型
            終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型
            標本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型
             
            自備材料
            1.蒸餾水。
            2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
            3.振蕩器及磁力攪拌器等。
             
            安全性
            1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
            2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
            3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
             
            操作注意事項
            1.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
            2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
            3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
            4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
            5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
            6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
            7.底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
            8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
            9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
             
            樣品收集、處理及保存方法
            1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
            2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
            3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
            4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
            5、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
             
            試劑的準備
            1.標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:
            8.0 ng/ml(6號標準品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。
            4.0 ng/ml(5號標準品)100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液
            2.0 ng/ml(4號標準品)100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液
            1.0 ng/ml(3號標準品)100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液
            0.5 ng/ml(2號標準品)100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液
            0.25 ng/ml(1號標準品)100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液
            0 ng/ml(空白對照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。
             
            2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。
             
            人激活素  (Activin) ELISA 檢測試劑盒
            操作步驟
            1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
            2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
            3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
            4.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
            5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
            6.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
            7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
            8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
            9.在450nm波長處測定各孔的OD值。
             
            建議使用的實驗方案
            標準品濃度(ng/ml)
            A8.08.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品
            B4.04.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品
            C2.02.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品
            D1.01.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品
            E0.50.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品
            F0.250.25樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品
            G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品
            H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品
             
             
            局限
            6號標準品以上的結果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到的結果。
             
            試劑盒性能
            1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。
            2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
            3. 重復性:板內、板間變異系數(shù)均小于10%。
             
            結 果 判 斷 與 分 析
            1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
             
            2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的Activin標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的Activin含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
             
            3、檢測值范圍:0-8.0ng/ml
             
            4、敏感度: 0.01 ng/ml
             
            綿羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒Sheep Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK ELISA試劑盒
            綿羊白介素2(IL-2)ELISA試劑盒Sheep Interleukin 2,IL-2 ELISA試劑盒 
            綿羊主要組織相容性復合體(MHC)ELISA試劑盒Sheep major histocompatibility complex,MHC ELISA試劑盒 
            綿羊白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 Sheep Interleukin 6,IL-6 ELISA試劑盒 
            綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒Sheep Interleukin 1β,IL-1β ELISA試劑盒 
            綿羊白介素1(IL-1)ELISA試劑盒Sheep Interleukin 1,IL-1 ELISA試劑盒 
            綿羊補體片段3b受體(C3bR)ELISA試劑盒Sheep Complement fragment 3b rccptor,C3bR ELISA試劑盒 
            綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒Sheep Interleukin-2 receptor,IL-2R ELISA試劑盒 
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            猴白介素6(IL-6)ELISA試劑盒Monkey Interleukin 6,IL-6 ELISA試劑盒
            猴γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒Monkey Interferon γ ,IFN-γ ELISA試劑盒
            猴胰島素(INS)ELISA試劑盒 Monkey Insulin,INS ELISA試劑盒
            猴子巨噬細胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒Monkey Macrophage Migration Inhibitory Factor,MIF ELISA試劑盒
             

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