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            檢查新生牛的血清病毒法

            閱讀:128          發(fā)布時(shí)間:2015-6-3

            1. 細(xì)胞培養(yǎng)法  
            (1)非血吸附病毒檢查  
            ELISA試劑盒將新生牛血清供試品分別接種到人源(如人二倍體細(xì)胞)、猴源(如Vero細(xì)胞)以及牛腎傳代細(xì)胞三種細(xì)胞,采用的牛腎傳代細(xì)胞系應(yīng)證明無(wú)牛病毒的污染。每種細(xì)胞至少接種6瓶,每瓶細(xì)胞懸液接種量不少于培養(yǎng)液總量的25%。于36±1℃培養(yǎng)21天。接種的每種細(xì)胞都應(yīng)同時(shí)設(shè)立牛血清陰性對(duì)照和病毒陽(yáng)性對(duì)照,陰性對(duì)照用牛血清應(yīng)證明無(wú)牛病毒污染。
            培養(yǎng)過(guò)程中可根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)情況更換細(xì)胞培養(yǎng)液,每次更換培養(yǎng)液前應(yīng)觀(guān)察(肉眼/顯微鏡)有無(wú)細(xì)胞病變出現(xiàn)。培養(yǎng)到期后,陰性對(duì)照應(yīng)無(wú)任何細(xì)胞病變出現(xiàn),陽(yáng)性對(duì)照應(yīng)出現(xiàn)典型的細(xì)胞病變,試驗(yàn)成立。ELISA試劑盒供試品檢查應(yīng)不出現(xiàn)任何細(xì)胞病變?yōu)殛幮?,符合要求?nbsp;
            (2)血吸附病毒檢查  
            ELISA試劑盒將上述接種供試品的每種細(xì)胞取2瓶進(jìn)行血吸附病毒檢查。用0.2%~0.5%雞和豚鼠紅細(xì)胞混合懸液覆蓋于細(xì)胞表面,置2~8℃分鐘,然后置20~25℃30分鐘,分別進(jìn)行鏡檢,觀(guān)察紅細(xì)胞吸附情況, 供試品檢查結(jié)果均應(yīng)為陰性。試驗(yàn)同時(shí)應(yīng)設(shè)立血吸附陽(yáng)性對(duì)照。 
            2. 免疫熒光抗體檢查法  
            采用直接或間接免疫熒光抗體檢查法,至少應(yīng)對(duì)牛腹瀉病毒,牛腺病毒、牛細(xì)小病毒、呼腸孤病毒、狂犬病病毒以及牛副流感病毒進(jìn)行檢查,結(jié)果均應(yīng)為陰性。AMBP     Protein    Human    重組人 AMBP / Alpha 1 microglobulin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
            FGF16     Protein    Human    重組人 / 食蟹猴 FGF16 / FGF-16 蛋白
            COL6A3     Protein    Human    重組人 COL6A3 / Collagen-VI 蛋白 (His 標(biāo)簽)
            IGFLR1     Protein    Human    重組人 IGFLR1 / TMEM149 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
            TNFRSF11A     Protein    Human    重組人 TNFRSF11A 蛋白 (His 標(biāo)簽)
            NCAM2     Protein    Human    重組人 NCAM2 / Neural cell adhesion molecule 2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
            NCAM2     Protein    Human    重組人 NCAM2 / Neural cell adhesion molecule 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
            FZD10     Protein    Human    重組人 Frizzled-10 / FZD10 蛋白 (His 標(biāo)簽)
            FZD10     Protein    Human    重組人 Frizzled-10 / FZD10 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
            KIRREL     Protein    Human    重組人 KIRREL / NEPH1 / KIRREL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
            MUSTN1     Protein    Human    重組人 MUSTN1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
            ATOX1     Protein    Human    重組人 ATOX1 / HAH1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
            RBKS     Protein    Human    重組人 RBKS / Ribokinase 蛋白 (His 標(biāo)簽)
            BIRC7     Protein    Human    重組人 BIRC7 / Livin 蛋白 (His 標(biāo)簽)
            RAB31     Protein    Human    重組人 RAB31 / Rab22B 蛋白 (His 標(biāo)簽)

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