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            上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>滴定緩沖溶液>>固定液>>FPA固定液

            FPA固定液

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            • 所在地 上海市

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            更新時(shí)間:2022-07-24 09:39:24瀏覽次數(shù):647

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            產(chǎn)品簡介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 500ml
            貨號 FS-R6782 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
            主要用途 僅供科研 貨號 FS-R6782
            FPA固定液公司正在銷售的產(chǎn)品:雞熱休克蛋白40(HSP-40)試劑盒 Anti-RAB3C Antibody羊抗大鼠IgG抗血清
            雞I型前膠原羧基端原肽(PICP)試劑盒Anti-RAB5A Antibody羊抗豚鼠IgG抗血清
            雞信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子2(STAT2)試劑盒Anti-RAB3GAP2 Antibody羊抗人IgG抗血清
            雞上皮膜抗原(EMA)試劑盒 Anti-RAB5A Ant

            詳細(xì)介紹

            公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購!

            產(chǎn)品名稱

            規(guī)格

            貨號

            FPA固定液

            500ml

            FS-R6782

            產(chǎn)品分類:固定液

            儲存條件:室溫,12個(gè)月

            用途:植物材料固定液

            注意事項(xiàng):主要由乙醇、丙酸、甲醛等組成。用于固定一般的植物材料,24H固定后效果比FAA固定液更好,并可長期保存材料。

            63.jpg 

             

            配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:

            1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;

            EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

            2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

            配制步驟:

            1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

            2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

            3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。

            13.jpg 

             

            實(shí)驗(yàn)方法與判定:

            1.對照品溶液的穩(wěn)定性

            2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

            3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

            4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

            返魂草(麻葉千里光)(標(biāo)準(zhǔn)品) Sodium glycodeoxycholate磷化蛋白酪激JAK-2抗體包裝1g

            芳樟(標(biāo)準(zhǔn)品) Sodium taurochenodeoxycholate凋亡清除受體抗體包裝1g

            防風(fēng)(標(biāo)準(zhǔn)品) glycodeoxycholicacid磷化原癌基因c-Jun抗體包裝250mg

            防己諾林堿(標(biāo)準(zhǔn)品) TunicamycinNotch配體Jagged 2蛋白抗體包裝5g

            防已(標(biāo)準(zhǔn)品) Scopolamine methyl bromide組蛋白去基化Jarid1C抗體包裝1g

            飛龍掌血根皮(標(biāo)準(zhǔn)品) Sodium deoxycholate組蛋白去基轉(zhuǎn)移JMJD1B抗體包裝5g

            飛揚(yáng)草(標(biāo)準(zhǔn)品) Tauroursodeoxycholic Acid Dihydrate親聯(lián)蛋白2抗體包裝25g

            洲防己堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Tauroursodeoxycholic Acid Sodium Salt 驅(qū)動蛋白家族蛋白13B抗體包裝100mg

            榧子(標(biāo)準(zhǔn)品) Novobiocin sodium驅(qū)動蛋白家族蛋白7抗體包裝1g

            粉萆薢(標(biāo)準(zhǔn)品) SulfamerazineCREB結(jié)合蛋白抗體包裝500mg

            粉防己堿;漢防己(標(biāo)準(zhǔn)品) Validamycin腦蛋白9抗體包裝5g

            楓香脂(標(biāo)準(zhǔn)品) Phleomycin絲裂原誘導(dǎo)蛋白2抗體包裝25g

            蜂房(標(biāo)準(zhǔn)品) Oligomycin, from Streptomyces鋅指蛋白393抗體包裝5g

            蜂膠(標(biāo)準(zhǔn)品) Netropsin dihydrochloride組蛋白賴特異性脫基1抗體包裝25g

            鳳尾草(標(biāo)準(zhǔn)品) Cephalosporin C zinc salt驅(qū)動蛋白樣蛋白1抗體(狀腺激受體相互作用蛋白5)包裝5g

            神戶類芽孢桿菌Paenibacillus│kobensis 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC),BR,可用于培養(yǎng)抗中性粒核周抗體試劑盒根薯內(nèi)酯B;Taccalonolide

            鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP33,BR抗中性粒胞漿抗體試劑盒根薯內(nèi)酯A;Taccalonolide

            北里鏈霉菌Streptomyces│kitasatoensis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品抗中性粒/中心體抗體試劑盒D-果糖;D(-)-Fructose
            FPA固定液ANG  人血管緊張su規(guī)格: 48T

            BCL-2(humen)  人細(xì)胞凋亡相關(guān)基因BCL-2規(guī)格: 48T

            P-Cadherin  人P-鈣粘附蛋白規(guī)格: 48T

            Calcitonin  人降鈣su規(guī)格: 48T

            AMA(mitochon-drial body)  人抗線粒體規(guī)格: 48T

            使用方法:

            1.  常用篩選濃度

            注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。

            一般而言,哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

            2. 殺滅曲線的建立

            注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。

            1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,可增加接種量。

            2)  根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

            3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

            4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

            5)  按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

            3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

            1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

            注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

            2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

            3)  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

            4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

            5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

             


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