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            上海撫生實業(yè)有限公司>>滴定緩沖溶液>>免疫組化>>Tris-EDTA抗原修復液

            Tris-EDTA抗原修復液

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            • Tris-EDTA抗原修復液

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            • 所在地 上海市

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            更新時間:2022-07-28 16:04:25瀏覽次數(shù):240

            聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

            產(chǎn)品簡介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100ml
            貨號 FS-R7264 應用領域 化工
            主要用途 僅供科研 貨號 FS-R7264
            Tris-EDTA抗原修復液公司正在銷售的產(chǎn)品:大鼠胰高血糖素(GC)試劑盒Anti-NOTCH1 Antibody游離狀腺原T3
            大鼠促性腺釋放(GnRH)試劑盒Anti-NOTCH1 Antibody大鼠乙脫氫酶
            大鼠粒趨化蛋白2(GCP-2)試劑盒Anti-NOTCH2 Antibody小鼠Slit2
            大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)試劑盒Anti-NOXO1 Antibody人表皮生長因

            詳細介紹

            公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

            產(chǎn)品名稱

            規(guī)格

            貨號

            Tris-EDTA抗原修復液

            100ml

            FS-R7264

            產(chǎn)品分類:免疫組化

            儲存條件:室溫,12個月

            用途:抗原修復緩沖液

            注意事項:主要由EDTA、Tris等組成,調(diào)PH8.0

            63.jpg 

             

            配制與標定的實驗原理:

            1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;

            EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

            2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

            配制步驟:

            1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

            2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

            3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。

            13.jpg 

             

            實驗方法與判定:

            1.對照品溶液的穩(wěn)定性

            2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

            3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。

            4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

            桑炭疽盤菌谷脫羧-65抗體Human TBCD ELISA Kit大鼠甲狀腺過氧化物(TPO)IgG抗體免疫試劑盒

            乳乳球菌乳亞種谷脫羧-65抗體(C端)Human TAF7 ELISA Kit大鼠甲狀腺過氧化物(TPO)免疫試劑盒

            粉擬青霉半乳糖凝集3抗體Human MTTP(Microsomal triglyceride transfer protein large subunit) ELISA Kit大鼠甲狀旁腺激相關蛋白(PTHrP)免疫試劑盒

            黑色附球孢菌神經(jīng)生長相關蛋白43Human TASP1 ELISA Kit大鼠甲狀旁腺激(PTH)免疫試劑盒

            鼠李糖乳桿菌3-磷甘油脫氫(兔來源免疫組化用抗體)Human TARSL2 ELISA Kit大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)免疫試劑盒

            布蘭克假絲酵母3-磷甘油脫氫單克抗體(內(nèi)參抗體)Human TARS2 ELISA Kit大鼠甲羥戊5-焦磷脫羧(MDD)免疫試劑盒

            細黃鏈霉菌乳糖變種生長停滯特異性蛋白2家族1抗體Human TAX1BP1 ELISA Kit大鼠低密度脂蛋白(VLDL)免疫試劑盒

            蠟狀芽孢桿菌G蛋白偶聯(lián)受體97抗體Human TAX1BP3 ELISA Kit大鼠激肽原(KNG)免疫試劑盒

            羊泰勒蟲(臨潭株-1)G蛋白結合蛋白7抗體Human TBC1D17 ELISA Kit大鼠激動異構/分裂MB(CKMB)免疫試劑盒

            巴斯德畢赤酵母綠色熒光蛋白抗體Human TBC1D19 ELISA Kit大鼠基質(zhì)衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)免疫試劑盒

            蠟樣芽孢桿菌綠色熒光蛋白抗體Human PANX1(Pannexin-1) ELISA Kit大鼠基質(zhì)衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)免疫試劑盒

            葡萄座腔菌G蛋白通路抑制蛋白1抗體Human TACC2 ELISA Kit大鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子3(TIMP-3)免疫試劑盒

            Myxococcus sp.膠質(zhì)系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α2抗體Human C4B(Complement C4-B) ELISA Kit大鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子2(TIMP-2)免疫試劑盒

            米舒青霉核突觸蛋白-γ抗體Human TACC3 ELISA Kit大鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)免疫試劑盒

            三孢布霉粒-巨噬克激因子抗體Human TADA1L ELISA Kit大鼠基質(zhì)金屬蛋白9/明膠B(MMP-9/Gelatinase B) 免疫試劑盒

            亞硝鹽對照液還原抗體Human TACO1/CCDC44 ELISA Kit大鼠基質(zhì)金屬蛋白8/中性粒膠原(MMP-8/Collagenase II)免疫試劑盒

            寡養(yǎng)野野村氏菌Nonomuraea│astidiosa corrig. 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品穗花杉雙黃

            : K77/39資源名稱: 吉夫沙門氏菌 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品, 用于環(huán)境分析沙苑子苷A

            擬莖點霉Phomopsis│liquidambari C.Q. Chang Z.D. Jiang & P.K. Chi 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99.9%(GC)巴豆苷
            Tris-EDTA抗原修復液TRACP-5b ELISA Kit  大鼠抗酒石suansuan性磷suanmei5b規(guī)格: 48T

            GIP ELISA Kit  大鼠葡萄糖依賴性胰島su釋放多肽規(guī)格: 48T

            GP-II ELISA Kit  大鼠糖原磷suan化mei同工meiII規(guī)格: 48T

            GP-MM ELISA Kit  大鼠糖原磷suan化mei同工meiMM規(guī)格: 48T

            GP-BB ELISA Kit  大鼠糖原磷suan化mei同工meiBB規(guī)格: 48T

            使用方法:

            1.  常用篩選濃度

            注意:用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。

            一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

            2. 殺滅曲線的建立

            注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。

            1)  第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

            2)  根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

            3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

            4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

            5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。

            3.   穩(wěn)定轉染細胞的篩選

            1)  轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

            注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

            2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

            3)  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。

            4)   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

            5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

             


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