金蓮橙O指示劑公司正在銷售的產(chǎn)品：雞蛋白激酶C-ε(PKCε)試劑盒Anti-ZP2 AntibodyAlexa Fluor 488標記的兔抗水貂IgG
雞唾液酸(SA)試劑盒 BrdUAlexa Fluor 555標記的兔抗水貂IgG
雞L苯解氨酶(PAL)試劑盒 Anti-β-catenin AntibodyAlexa Fluor 647標記的兔抗水貂IgG
雞糖盞蛋白(GC)試劑盒Anti-

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產(chǎn)品分類：指示劑

儲存條件：室溫,避光,12個月

用途：單一酸堿指示劑

注意事項：又稱間苯二酚磺,金蓮橙O變色范圍：11.0-13.0,顏色由黃綠變?yōu)槊倒迳?/span>

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

根瘤菌磷化受體酪激c-Abl抗體Human MANSC1 ELISA Kit小鼠轉化生長因子β1(TGF-β1)免疫試劑盒

芹側耳（杏鮑菇）β淀粉樣前體蛋白結合蛋白1抗體（X11α）Human MAP4K1(MEK Kinase Kinase 1) ELISA Kit小鼠轉化生長因子α(TGF-α)免疫試劑盒

海神魯杰氏菌載脂蛋白E抗體Human MAGEC3 ELISA Kit小鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關因子(TSGF)免疫試劑盒

芽孢桿菌屬甲胎蛋白AFP抗體Human MAK ELISA Kit小鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體受體4(TRAIL-R4)免疫試劑盒

類銀白紫絲膜菌陰離子交換蛋白2抗體Human MAP4K2 ELISA Kit小鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體受體3(TRAIL-R3)免疫試劑盒

釀酒酵母鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體Human MAGED2 ELISA Kit小鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體1(TRAIL-R1)免疫試劑盒

球孢白僵菌三磷腺苷家族蛋白3A抗體Human MAGED1( MAGE family member D1) ELISA Kit小鼠腫瘤壞死因子受體相關因子6(TRAF6)免疫試劑盒

Pseudomonas plecoglossicida  載脂蛋白J抗體Human MAGEF1 ELISA Kit小鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員11A(TNFRSF11A/RANK)免疫試劑盒

海棗曲霉載脂蛋白H抗體Human MAGED4 ELISA Kit小鼠腫瘤壞死因子配體相關分子-1(TL1)免疫試劑盒

棲植物潘亞堿湖桿菌二磷腺苷核糖基轉移4抗體Human MAGEH1 ELISA Kit小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)免疫試劑盒

馬褂木炭疽盤孢菌AKIRIN2蛋白抗體Human MBD2 ELISA Kit小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)免疫試劑盒

阿姆斯特丹曲霉ADP核糖基化樣因子8B抗體Human MC3R(Melanocortin receptor 3) ELISA Kit小鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)免疫試劑盒

蒙氏假單胞菌三磷腺苷家族蛋白2抗體Human MBD3(Methyl-CpG-binding domain protein 3) ELISA Kit小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)抗體免疫試劑盒

糙皮側耳AKIRIN1蛋白抗體Human MBD4 ELISA Kit小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒

暗產(chǎn)色鏈霉菌錨定蛋白樣蛋白1抗體Human MARK4 ELISA Kit小鼠腫瘤標志物(CA724)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌腺苷激2抗體Human MBD5(Methyl-CpG-binding domain protein 5) ELISA Kit小鼠中性粒明膠相關脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)免疫試劑盒

結核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR表皮生長因子受體試劑盒鹽白屈菜紅堿

芽孢桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,分子生物學級表皮生長因子試劑盒銀杏

蠟狀芽孢桿菌Bacillus cereus 質(zhì)量規(guī)格：分子生物學級表睪野菊花內(nèi)酯
金蓮橙O指示劑CK-19(Human cytokeratin 19) ELISA Kit  人細胞角蛋白19規(guī)格： 48T

CK-18(Human cytokeratin 18) ELISA Kit  人細胞角蛋白18規(guī)格： 48T

CgA(Human Chromogranin) ELISA Kit  人嗜鉻蛋白A規(guī)格： 48T

pRB(Human retinoblastoma tumor suppressor protein) ELISA Kit  人shi網(wǎng)膜母細胞瘤抑制蛋白規(guī)格： 48T

MPF(Human maturation promoting factor) ELISA Kit  人成熟促進因子規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細胞類型，設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。