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            SB固體培養(yǎng)基粉劑

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            • SB固體培養(yǎng)基粉劑

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            • 所在地 上海市

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            更新時間:2022-07-04 12:27:30瀏覽次數(shù):255

            聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

            產(chǎn)品簡介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1L
            貨號 FS-R6413 應用領(lǐng)域 化工
            主要用途 僅供科研 貨號 FS-R6413
            SB固體培養(yǎng)基粉劑公司正在銷售的產(chǎn)品:兔突觸核蛋白α(SNCα)試劑盒 Anti-CD40 Antibody癌抑制基因Protor1抗體
            兔6-羥多巴(6-OHDA)試劑盒 Anti-CD40 Antibody端粒保護蛋白1抗體
            兔伴侶蛋白10(CPN10)試劑盒 Anti-CD40LG Antibody前列腺癌相關(guān)蛋白2抗體
            兔甲狀旁腺受體2(PTHR2)試劑盒Anti-CD40 Antibo

            詳細介紹

            產(chǎn)品分類:培養(yǎng)基

            儲存條件  室溫,24個月

            用途  質(zhì)粒制備和蛋白質(zhì)表達

            注意事項  主要由高濃度胰蛋白胨和酵提取物、氯化鈉、瓊脂等組成。如要求無菌,可高壓滅菌15~20min。

            公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

            產(chǎn)品名稱

            規(guī)格

            貨號

            SB固體培養(yǎng)基粉劑

            1L

            FS-R6413

             

            63.jpg 

             

            配制與標定的實驗原理:

            1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;

            EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

            2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

            配制步驟:

            1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

            2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

            3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。

            13.jpg 

             

            實驗方法與判定:

            1.對照品溶液的穩(wěn)定性

            2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

            3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。

            4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

            使用方法:

            1.  常用篩選濃度

            注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。

            一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

            2. 殺滅曲線的建立

            注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。

            1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

            2)  根據(jù)細胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

            3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

            4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

            5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

            3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

            1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

            注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

            2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

            3)  篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

            4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

            5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

            序列相似家族135成員B(FAM135B)FAM135B ELISA Kit鈣粘蛋白23抗體包裝1g

            4(OLFM4)OLFM4 ELISA Kit色p450 2s1抗體包裝5g

            胸腺旁腺(PTMS)PTMS ELISA Kit角蛋白16抗體包裝100g

            胸腺嘧啶核苷磷化(TP)TP ELISA Kit半胱蛋白蛋白-6抗體包裝25g

            胸腺激活調(diào)節(jié)趨化因子(TARC)TARC ELISA Kitc-fos抗體包裝5g

            胸腺基質(zhì)淋巴細胞生成(TSLP)TSLP ELISA Kit9號染色體開放閱讀框23抗體包裝1g

            胸腎表達趨化因子(BRAK)BRAK ELISA Kit9號染色體開放閱讀框25抗體包裝100ml

            興奮性基轉(zhuǎn)運蛋白2(EAAT2)EAAT2 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框30抗體包裝25ml

            信號7A(SEMA7A)SEMA7A ELISA Kit9號染色體開放閱讀框37抗體包裝500ml

            信號3E(SEMA3E)SEMA3E ELISA Kit9號染色體開放閱讀框40抗體包裝1g

            鋅指同源框蛋白1B(ZFHX1B)ZFHX1B ELISA Kit9號染色體開放閱讀框41抗體包裝25g

            鋅結(jié)合α2-糖蛋白1(αZGP1)αZGP1 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框5抗體包裝5g

            心營養(yǎng)樣細胞因子1(CLCF1)CLCF1 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框50抗體包裝100g

            心型脂肪結(jié)合蛋白(FABP3)FABP3 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框57抗體包裝25g

            心肌營養(yǎng)1(CT1)CT1 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框6抗體包裝500g

            大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>97%,培養(yǎng)級左右不對稱發(fā)育因子2試劑盒白喉抗體品

            大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,標準品組織因子途徑抑制物-2試劑盒抗狀腺過氧化物抗體

            大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于培養(yǎng)組織因子途徑抑制物試劑盒乙型肝炎病表面抗體(Anti-HBs)
            SB固體培養(yǎng)基粉劑phospho-GAB2(Ser623) /FITC  熒光標記化接頭蛋白Gab2體IgGICP排液管

            phospho-GAB2 (Tyr452) /FITC  熒光標記化接頭蛋白Gab 2IgGICP進樣管

            phospho-GAB2 (Tyr643) /FITC  熒光標記化接頭蛋白Gab2IgG1-金剛烷 99%

            phospho-GAB2 (Ser623) /FITC  熒光標記化接頭蛋白Gab 2IgG反式-1,2-環(huán)己二 ≥95.0% (GC)

            GAD-65/FITC  熒光標記谷氨脫羧-65IgG反式-1,2-環(huán)己二 98%

            GAD-65(CT)/FITC  熒光標記谷氨脫羧-65(C端多肽)IgG環(huán)己 AR,98%

            GAD-67 /FITC  熒光標記谷氨脫羧-67IgG環(huán)己烯  ≥99.0% (GC)

            GADD34/FITC  熒光標記生長抑制DNA損傷因34IgG環(huán)氧環(huán)己烷 98%


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