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            產(chǎn)品展廳收藏該商鋪

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            上海撫生實業(yè)有限公司>>滴定緩沖溶液>>細胞組分分離>>蘋果酸脫氫酶提取試劑

            蘋果酸脫氫酶提取試劑

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            • 所在地 上海市

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            更新時間:2022-07-05 09:40:16瀏覽次數(shù):274

            聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

            產(chǎn)品簡介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 500ml
            貨號 FS-R6558 應用領域 化工
            主要用途 僅供科研 貨號 FS-R6558
            蘋果酸脫氫酶提取試劑公司正在銷售的產(chǎn)品:兔孕/孕酮(Pg)試劑盒Anti-GZMB Antibody腫瘤壞死因子受體超家族成員13B抗體
            兔胸腺依賴性抗原(TD-Ag)試劑盒Anti-H1-0 AntibodyToll樣受體8抗體
            兔黑色素瘤關聯(lián)硫酸軟骨素蛋白聚糖(MCSP)試劑盒 Anti-H3C1 Antibody胸腺素抗體
            兔脂肪酸去飽和酶2 (FADS2)試劑盒Anti-HAS2 Ant

            詳細介紹

            產(chǎn)品分類:細胞組分分離

            儲存條件:—20℃,避光,12個月

            用途:主要用于裂解植物組織,提取樣品中的蘋果酸脫氫酶

            注意事項:蘋果酸脫氫酶(Malate Dehydrogenase, MDH)是合成蘋果酸的關鍵酶之一,催化蘋果酸和草酰乙酸(OAA)的相互轉(zhuǎn)化,參與眾多生理代謝途徑如TCA循環(huán)C4循環(huán)脂肪酸的氧化呼吸作用氮同化等,因此MDH在植物的生長發(fā)育中發(fā)揮著重要作用,廣泛存在于線粒體、細菌細胞膜上,為三羧酸循環(huán)中的一種酶,由于酶的來源不同,其某些性質(zhì)也不盡相同。MDH在細胞多種生理活動中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、?耄???鉩?????蘢????娂蒼????逝

            公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

            產(chǎn)品名稱

            規(guī)格

            貨號

            蘋果酸脫氫酶提取試劑

            500ml

            FS-R6558

             

            63.jpg 

             

            配制與標定的實驗原理:

            1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;

            EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

            2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

            配制步驟:

            1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

            2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

            3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。

            13.jpg 

             

            實驗方法與判定:

            1.對照品溶液的穩(wěn)定性

            2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

            3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。

            4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

            使用方法:

            1.  常用篩選濃度

            注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。

            一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

            2. 殺滅曲線的建立

            注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。

            1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

            2)  根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

            3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

            4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

            5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

            3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

            1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

            注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

            2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

            3)  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

            4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

            5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

            萘乙酰(標準品) Oxcarbazepine補體C4b-A蛋白抗體包裝100mg

            泊金酯(標準品) Oxcarbazepine磷化整合β2/Integrin β2抗體包裝1g

            泊金酯(標準品) Hypericin磷化整合β2/Integrin β2抗體包裝5g

            泊金乙酯;酯(標準品) D-(+)-Glucopyranose 6-phosphate4號染色體開放閱讀框28抗體包裝100g

            爾雌(標準品) D-Gluconate 6-phosphate 3sodium salt  陽離子通道相關蛋白2抗體包裝25g

            可地爾(標準品) Azathioprine陽離子通道相關蛋白3抗體包裝5g

            可占替諾(煙占替諾)標準品 Barnidipine HCl液泡蛋白分選蛋白VPS13A抗體包裝1g

            羅替(標準品) Cefepime Hydrochloride鈣調(diào)磷B相關蛋白2抗體包裝1g

            麥角林(標準品) Cefepime HydrochlorideCHRAC1蛋白抗體包裝5g

            舒(標準品) Loxoprofen sodiumATP依賴的解螺旋抗體包裝1g

            莫(標準品) Loxoprofen sodiumX染色體開放閱讀框6抗體包裝5g

            莫雜質(zhì)Ⅰ/2,6-二基-4-(3-基)-... Paeonol硫軟骨2抗體包裝1g

            群(標準品) Paeonol碳化合物磺基轉(zhuǎn)移10抗體包裝5g

            群雜質(zhì)A(標準品) Rotundine/ L-Tetrahydropalmatine碳化合物磺基轉(zhuǎn)移11抗體包裝1g

            索(標準品) Liranaftate碳化合物磺基轉(zhuǎn)移12抗體包裝250g

            根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品間粘附分子2試劑盒絲石竹皂苷元3-O-B-D葡萄糖酯

            香菇Lentinula│edodes 質(zhì)量規(guī)格:>99%,EP5.0間粘附分子1試劑盒L-鼠李糖;L(+)-Rhamnose

            CBS277.70=ATCC22054資源名稱: 森正青霉 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品性T淋巴相關抗原4試劑盒松香;Abietic Acid
            蘋果酸脫氫酶提取試劑PERK/FITC  熒光標記蛋白激R樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激IgG鈉,無水 AR,99.0%             

            Phospho-PERK (Thr980)/FITC  熒光標記化蛋白激樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激IgG鈉,無水 99.99% metals basis

            peripherin/FITC  熒光標記外周蛋白IgG鋅,二水 AR,99.0%

            HSP-27/HRP  辣根過氧化物標記熱休克蛋白27IgG鋅,二水 CP,98.0%

            P-fscn1/FITC  熒光標記化纖維束蛋白同源物1/肌動蛋白集束蛋白/圓線蟲紫癜 IgG鋅,二水 99.99% metals basis

            PG-C/FITC  熒光標記胃蛋白原CIgG鋅,二水 99.995% metals basis

            PGC-1 Alpha/FITC  熒光標記過氧化物體增殖物激活受體γ輔激活子1αIgG無水醋鋅 CP,99.0-1.0%

            PGE2/FITC  熒光標記前列腺E2IgG2-酰吡啶 98%


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