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            上海撫生實業(yè)有限公司>>滴定緩沖溶液>>細胞培養(yǎng)>>電誘導細胞融合試劑盒

            電誘導細胞融合試劑盒

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            • 所在地 上海市

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            更新時間:2022-07-04 11:56:09瀏覽次數(shù):266

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            產(chǎn)品簡介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 20T
            貨號 FS-R6396 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
            主要用途 僅供科研 貨號 FS-R6396
            電誘導細胞融合試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品:兔囊性纖維化跨膜傳導調(diào)節(jié)因子(CFTR)試劑盒Anti-CCL4 Antibody含酸突觸相關(guān)蛋白相互作用蛋白1抗體
            兔抗胰島素受體抗體(AIRA)試劑盒 Anti-CCL26 Antibody外周蛋白2抗體
            兔蛋白C抑制劑(PCI)試劑盒Anti-CCL3 Antibody區(qū)帶蛋白PZP抗體
            兔葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)試劑盒 Anti-CCL2

            詳細介紹

            63.jpg
            產(chǎn)品分類:細胞培養(yǎng)

            儲存條件  4℃,6個月

            用途  利用電誘導細胞融合

            注意事項  無菌溶液。其作用原理是先使細胞在在電場中極化成偶極子,并延電力線成串排列,用高強度、短時程的電脈沖擊穿細胞膜,促使細胞發(fā)生融合。該細胞融合方法具有無毒、融合頻率高、易控制等優(yōu)點。

            公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

            產(chǎn)品名稱

            規(guī)格

            貨號

            電誘導細胞融合試劑盒

            20T

            FS-R6396

             

            配制與標定的實驗原理:

            1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;

            EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

            2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

            配制步驟:

            1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

            2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

            3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。

            13.jpg 

             

            實驗方法與判定:

            1.對照品溶液的穩(wěn)定性

            2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

            3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。

            4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

            使用方法:

            1.  常用篩選濃度

            注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。

            一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

            2. 殺滅曲線的建立

            注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。

            1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

            2)  根據(jù)細胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

            3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

            4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

            5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

            3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

            1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

            注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

            2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

            3)  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

            4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

            5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

            可溶性CD80(sCD80/B7-1)sCD80/B7-1 ELISA Kitβ1,3半乳糖轉(zhuǎn)移3抗體包裝25g

            可溶性CD80(sCD80)sCD80 ELISA Kit紅陰離子交換蛋白1抗體包裝500g

            巨細胞集落刺激因子(GM-CSF)GM-CSF ELISA Kit腦特定蛋白Brn3B抗體包裝5g

            巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)MIP-1α/CCL3 ELISA KitBcl-2同源結(jié)構(gòu)域蛋白抗體包裝100g

            巨嗜細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)MCP-1/CCL2/MCAF ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白4抗體包裝25g

            巨嗜細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2)MCP-1/CCL2 ELISA Kit腦和急性白血病胞漿蛋白抗體包裝5g

            膠質(zhì)細胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)GDNF ELISA Kit骨髓基質(zhì)干抗原2抗體包裝25g

            堿性成纖維細胞生長因子9(FGF9)FGF9 ELISA Kit組蛋白相關(guān)Bmi1抗體包裝5g

            激活A(Activin A)Activin A ELISA Kit癌轉(zhuǎn)移抑制基因1抗體包裝100mg

            活化A(Activin-A)Activin-A ELISA Kit大腦富含鳥苷激相關(guān)蛋白抗體包裝5MG

            核心蛋白聚糖(DCN)DCN ELISA Kit腦富含膜附著信號蛋白1抗體包裝5g

            肝細胞生長因子受體(c-MET/HGFR)c-MET/HGFR ELISA Kit卵黃狀黃斑病蛋白3抗體包裝1g

            分化簇抗原30配體(CD30L)CD30L ELISA Kit卵黃狀黃斑病蛋白抗體包裝5g

            二肽基肽IV(DPP4/CD26)DPP4/CD26 ELISA Kit卵黃狀黃斑病蛋白4抗體包裝1g

            二肽基肽4(DPP4/CD26)DPP4/CD26 ELISA Kit炭疽桿菌菌體蛋白抗體包裝5g

            磷化蛋白激B抗體干擾α2(IFNα2)Ki16198 is the methyl ester of Ki16425, which is a LPA antagonist and inhibits L
            電誘導細胞融合試劑盒EPOR/FITC  熒光標記紅生成受體IgG間溴苯 98%

            ER/FITC  熒光標記雌激受體IgG溴烷  99%

            ERAB/FITC  熒光標記內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白IgG正丁烷 CP,98%

            ERCC1/FITC  熒光標記抗切除修復交叉互補因1IgG對溴苯 99%

            ERK1/ERK /FITC  熒光標記絲裂原活化蛋白激1IgG異烷 CP

            p-ERK1/p-MAPK-1/2 /FITC  熒光標記化絲裂原活化蛋白激1/2IgG異烷  99%

            ERK1/2/FITC  熒光標記絲裂原活化蛋白激1/2IgG異烷 ,≥99.8% (GC)

            Eph receptor B2/FITC  熒光標記Eph receptor B2IgG2-溴-5-氧苯 98%


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