公司產(chǎn)品僅供科研使用:
商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義: 丙酮酸通過(guò)乙酰CoA連接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代謝,起著重要的樞紐作用。 測(cè)定原理: 丙酮酸與2,4-二硝ji苯肼作用,生成丙酮酸-2,4-二硝ji苯腙,在堿性溶液中呈櫻紅色。 需自備的儀器和用品: 可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水。 |
常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
蟾靈;蟾酥靈(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 1,3-DihydroxynaphthaleneFMS樣酪激3配體抗體包裝250mg
長(zhǎng)春里寧英文名: 1,4-3,6-Dianhydro-D-mannitol堿性成纖維生長(zhǎng)因子9抗體包裝25g
長(zhǎng)春新堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 1,4-Cyclohexanedione原癌基因酪蛋白激FES抗體包裝100g
常春藤苷C(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 1,4-Diaminoanthraquinone成纖維生長(zhǎng)因子16抗體包裝25g
常春藤苷D英文名: 1,4-Dihydroxyanthraquinone成纖維激活蛋白α抗體包裝5g
常春藤苷H;灰氈毛忍冬次皂苷英文名: 1,5-DiaminonaphthaleneFas相關(guān)磷1抗體包裝1g
常春藤皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 1,5-Dihydroxynaphthalene葉受體4抗體包裝25g
常春藤皂苷元-28-O-β-D-葡萄糖酯苷英文名: 1,6-DihydroxynaphthaleneWnt信號(hào)受體蛋白抗體包裝5g
常山(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 1,8-Octanediol磷化載脂蛋白A1抗體包裝1g
巢脾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 1-Acetonaphthone磷化載脂蛋白A1抗體包裝25g
朝藿定A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 1-Adamantanol磷化堿性成纖維生長(zhǎng)因子受體1抗體包裝5g
朝藿定A1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 1-Bromonaphthalene脂肪酰解1抗體包裝100g
朝藿定C(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 1-Bromooctane外基質(zhì)蛋白FRAS1抗體包裝25g
車前草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 1-Methylimidazole富馬合抗體包裝500g
車前草(車前)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 1-Ethylimidazole成纖維生長(zhǎng)因子21抗體包裝5g
: IFO14900FRIBP2535ATCC33849資源名稱: 大腸埃希氏菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%生長(zhǎng)分化因子-9試劑盒七葉樹(shù)皂苷B;Aesculuside B
膠孢Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品生長(zhǎng)分化因子3試劑盒8-去乙?;釣鯄A;8-deacetyl
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%生長(zhǎng)分化因子2試劑盒羥基吳茱萸堿;Hydroxyevodia
丙酮酸(PA)含量測(cè)試盒50管/48樣孔曲霉 2,3-二氮雜萘二肽基肽ⅥElisa
枯草芽孢桿枯草亞種 3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環(huán)戊烷-2-基)甲苯胸苷酸磷酸化Elisa
炭黑曲霉 (R)-(-)-3-喹寧外膜蛋白AElisa
蠟狀芽孢桿 二異苯(異構(gòu)體混合物)精;絲豐富剪接因子1Elisa
弗氏檸檬酸 芐氧羰基-N-芐基-Beta-胸腎表達(dá)趨化因子Elisa
解脂復(fù)膜孢酵母(亞羅解脂酵母) 2-叔丁基環(huán)己基乙酸酯胱硫Elisa
鮑魚(yú)菇 反式4-甲基環(huán)己解脲支原體Elisa
粉紅單端孢霉 3-(3,4,5-氧基苯基)酸奈瑟Elisa
豬丹絲 雙(2,2,6,6-四甲基-4-基)癸二酸酯氮氧自由基磷酸絲Elisa
玉米大斑病 環(huán)磷酸羥基酮酸Elisa
厚垣孢普可尼亞 3-氟-4-苯乙3-磷酸甘油酸酯Elisa
米蘭農(nóng)霉 3-氟-4-苯乙屋塵螨變應(yīng)原Derp1 IgE抗體Elisa
墨西哥假黃色單胞 硫酸鋁,99.99%(metalsbasis)β-內(nèi)酰Elisa
枯草芽孢桿 1-甲基-4-甲氧羰基吡唑-5-磺酰新型抑癌基因X連鎖凋亡抑制蛋白相關(guān)因子-1Elisa
細(xì)黃鏈霉 2-(2-苯氧基)酸乳酸脫氫Elisa
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。