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詳細介紹
商品介紹：
測定意義： MCS廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞的線粒體基質(zhì)中，與檸檬酸合酶（CS）共同參與三羧酸循環(huán)的調(diào)節(jié)。 測定原理： MCS催化丙酰CoA和草酰乙酸產(chǎn)生甲基檸檬酰fu酶A，進一步水解產(chǎn)生甲基檸檬酸；該反應(yīng)促使無色的DTNB轉(zhuǎn)變成黃色的TNB，在 412nm處有特征吸光值。 需自備的儀器和用品： 可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、無水乙醇和蒸餾水 |
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/48樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321151 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi)，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi)，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2?！鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4?！鰽測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
赤脛散（標準品）英文名： 2-Hydroxyacetophenone范可尼貧血組蛋白A抗體包裝25g
赤芍(川赤芍)（標準品）英文名： 2-Isopropylimidazole卷曲蛋白3抗體包裝5g
赤芍（標準品）英文名： 2-NAA, 2-Naphthaleneacetic acid分裂周期樣蛋白20抗體包裝100g
蟲草(標準品)英文名： 2-Naphthaldehyde鐵氧化還原蛋白還原抗體包裝25g
臭靈丹（標準品）英文名： 2-Naphthyl acetate磷化堿性成纖維生長因子受體1抗體包裝5g
臭梧桐葉（標準品）英文名： 3,4,5-Trimethoxycinnamic acid精結(jié)合蛋白17抗體包裝25g
川貝母（標準品）英文名： 3,4-Dimethoxybenzaldehyde泛樣核糖體蛋白S30/MNSF-β抗體包裝5g
川陳皮(標準品)英文名： 3-HydroxybenzaldehydeF-box蛋白2抗體包裝100g
川燈心草（標準品）英文名： 3-Hydroxycinnamic acidF-box蛋白45抗體包裝500g
川楝(標準品）英文名： 4,4-Dihydroxydiphenyl sulfone法尼基二磷合抗體包裝1g
川楝子（標準品）英文名： 4,5-DichlorofluoresceinIgG-Fc片斷受體轉(zhuǎn)運蛋白α抗體包裝25g
川麥冬苷A英文名： 4-Ethoxybenzaldehyde?；铣?抗體包裝5g
川木通（標準品）英文名： 4-Hydroxycoumarin補體因子D抗體包裝25g
川木香（標準品）英文名： 4-Methoxyphenol補體因子I輕鏈抗體包裝5g
川牛膝（標準品）英文名： 4-Methylcinnamic acidFAHD1蛋白抗體包裝10g
多粘類芽孢桿菌Paenibacillus│polymyxa 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>97%,BR腎損傷分子1試劑盒去亞基小檗堿;Demethyleneb
AS2.181資源名稱: 魯氏接合酵母 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR腎前體3,5,6,7,8,3’,4’-七氧基
: B739資源名稱: 谷棒桿菌 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品腎試劑盒25-羥基原人參二;25-OH-PPD
甲基檸檬酸合酶(MCS）測試盒50管/48樣類高加索酸奶乳桿 巰基苯并噻唑鈉結(jié)核桿IGM抗體Elisa
糙皮側(cè)耳 3-環(huán)戊基-3-氧代酸乙酯分泌型Klotho蛋白Elisa
慢生海桿狀* 4-[(4-氨基苯基)偶氮]苯磺酸單鈉鹽纖維結(jié)合蛋白Elisa
卷枝毛霉詹森變型 (S)-2,6-二叔丁氧羰基氨基己酸可溶性E鈣粘著蛋白;可溶性上皮性鈣黏附蛋白Elisa
黃赭色鏈霉 3-氟-2-甲苯膜聯(lián)蛋白-A2IgG抗體Elisa
阪崎腸桿 2-甲基丁酸苯乙酯膜聯(lián)蛋白-A2IgM抗體Elisa
羅爾斯通氏 3-氨基-4-甲氧基甲酯膜聯(lián)蛋白-A5IgG抗體Elisa
釀酒酵母 4-羥基丁基烯酸酯膜聯(lián)蛋白-A5IgM抗體Elisa
巴斯德畢赤酵母 5-溴-2-甲氧基糖基化終末產(chǎn)物Elisa
糞產(chǎn)堿 克林霉磷酸酯酪酪肽3-36Elisa
漢遜德巴酵母 2,3-二氟-4-溴苯丁PIM1激Elisa
釀酒酵母 2-溴-4,5-二氟長鏈?；摎銭lisa
無色桿 基酮長鏈酰基脫氫Elisa
青藍鏈霉 2-異丁基-3-甲氧基吡多氧化Elisa
假堅強芽孢桿 2,3-二羥基苯甲抗流行性出血熱病IgM抗體Elisa
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
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