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            磷脂酶D(PLD)測(cè)試盒50管/48樣

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            • 品牌 其他品牌
            • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
            • 所在地 上海市

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            更新時(shí)間:2022-06-17 15:24:21瀏覽次數(shù):275

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            產(chǎn)品簡(jiǎn)介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50管/48樣
            貨號(hào) AS6321192 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
            主要用途 僅供科研 檢測(cè)方法 可見(jiàn)分光光度法
            磷脂酶D(PLD)測(cè)試盒50管/48樣公司正在出售的產(chǎn)品:磷化蛋白酪JAK-3抗體FLIP S/L peptide 凋亡調(diào)節(jié)基因之一(多肽抗原)
            磷化蛋白酪JAK-3抗體FoxP3 叉頭蛋白3-T轉(zhuǎn)錄因子(多肽抗原)
            磷化原癌基因c-Jun抗體GAD-65 (glutamate decarboxylase) 谷脫羧-65(抗原)
            蛋白質(zhì)酪JAK2抗體GAP-43 ( Growth assoc

            詳細(xì)介紹

            商品屬性:

            產(chǎn)品名稱

            磷脂酶D(PLD)測(cè)試盒50管/48樣

            檢測(cè)方法

            可見(jiàn)分光光度法

            產(chǎn)品規(guī)格

            50管/48樣

            產(chǎn)品貨號(hào)

            AS6321192

            商品介紹:

            測(cè)定意義

            磷脂酶D(EC3.1.4.4)即磷脂酰膽堿水解酶,是催化磷酸二酯鍵水解和堿基交換反應(yīng)的一類酶的總稱,廣泛存在于高等動(dòng)植物和細(xì)菌等多種生物體中,具有參與細(xì)胞脂質(zhì)代謝、信號(hào)傳導(dǎo)、生物膜形成的抗逆境脅等生理功能。

            測(cè)定原理

            磷脂酶D催化水解磷脂酰膽堿末端的磷脂酰二酯鍵生成磷脂酸和膽堿,膽堿在膽堿氧化酶催化作用下生成甜菜堿和過(guò)氧化氫,過(guò)氧化氫在過(guò)氧化氫酶的作用下將4-氨基安替bi林和重蒸酚氧化成粉紅色物質(zhì),在500nm處有特征吸收峰。

            自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

            天平、研缽、超速冷凍離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋,無(wú)水乙醇。

            試劑的組成和配制:

            酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。

            自備儀器和用品:

            可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

            NAD+和NADH的提?。?/span>

            1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取

            NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建

            議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);

            冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中

            和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

            NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建

            議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);

            冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中

            和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

            2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span>

            NAD+的提取:按照組織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g

            組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴

            中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

            NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g

            組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴

            中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和,

            混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

            3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提取:

            NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性

            提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液),

            超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min

            (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加

            入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

            NADH的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿

            性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液),

            超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min

            (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加

            入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

            ADH測(cè)定操作:

            1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零。

            2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。

            3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。

            4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測(cè)定管=A3-A4。

            注意:空白管只需測(cè)定一次。

            注意事項(xiàng):

            ①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

            ②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

            ③按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

            ④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

            ⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

            ⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。

            ⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

            ⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。

            ⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。

            偽金絲桃英文名: D-Ribose 5-phosphate disodium salt hydrate組受體H1抗體包裝1g

            偽原(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Hematoxylin同源盒蛋白HOXA9抗體包裝5g

            委陵菜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Adenosine 5‘-monophosphate sodium salt同源盒蛋白HOXB5抗體包裝1g

            衛(wèi)矛堿英文名: CTP.Na2肝粘附分子抗體包裝25g

            文多靈(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 5-Methyluridine磷化組蛋白去乙?;?抗體包裝5g

            烏金苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 2,2'-O-Cyclouridine磷化組蛋白去乙?;?抗體包裝5g

            烏靈菌粉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: X-gal磷化組蛋白去乙?;?抗體包裝1g

            烏梅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Fluorescamine磷化HOMER3蛋白抗體包裝25g

            烏梢蛇(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 4-Chloro-1-naphthol (4-CN)轉(zhuǎn)化蛋白p21抗體(原癌基因H-ras抗體)包裝5g

            (標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Avidin from egg white轉(zhuǎn)錄因子HES-1抗體包裝100g

            英文名: Streptavidin from Streptomyces avidinii組蛋白H4-K4基轉(zhuǎn)移抗體包裝25g

            內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Sitafloxacin HydrateHOMER3蛋白抗體包裝5g

            內(nèi)酯英文名: DHBS磷化HER3受體抗體包裝10KU

            烏賊墨(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Disodium beta-glycerophosphate pentahydrate磷化HER4抗體包裝250mg

            吳茱萸(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Fura 2-AM磷化HER4抗體包裝100g

            芽孢桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR免白M試劑盒血平;Alserin

            AS3.381資源名稱: 米曲霉 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR免疫球蛋白j鏈試劑盒硫長(zhǎng)春質(zhì)堿;Catharanthine

            : ivcas7.01200資源名稱: 蘇云金芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品免疫球蛋白G4試劑盒蓮心堿;Liensinine
            磷脂酶D(PLD)測(cè)試盒50管/48樣動(dòng)物雙歧桿 對(duì)甲苯酰核糖核酸A1Elisa

            巴氏醋桿羅旺亞種 1,1'-雙(二-叔丁基膦基)二茂鐵尿苷二磷酸葡萄糖酸轉(zhuǎn)移Elisa

            光帽磷傘 3-硝基芐高爾基體膜蛋白Elisa

            芽胞桿 3-乙氧基烯酸復(fù)合型表皮生長(zhǎng)因子樣結(jié)構(gòu)域蛋白8Elisa

            尖鐮孢黃瓜專化型(黃瓜枯萎?。?/span> 2-(1-萘基)-5-苯基噁唑低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白2Elisa

            多布克魯維酵母 3,4-二氨基血紅蛋白β亞基Elisa

            白僵 3-甲酯跨膜受體蛋白Notch-2Elisa

            樟疫霉 4-芐氧基-3-苯酸Ⅴ型膠原α2Elisa

            醋化醋桿 3-溴甲酯LINGO1Elisa

            釀酒酵母 3,5-二溴O-連鎖-N-乙酰葡糖基轉(zhuǎn)移Elisa

            檸檬兩面神 2--4-氟-5-DNA甲基轉(zhuǎn)移3LElisa

            熱線鏈霉 4-基-3-氟苯酸口腔癌致病基因BPIFB2Elisa

            膠孢 3-(丁基苯氨基)錨蛋白Elisa

            小孢擬棘殼孢 5,7-二氟-1-印酮脫氫3家族成員A1Elisa

            沉積物假海源桿 環(huán)烷酸鈣腎小管間質(zhì)腎炎抗原Elisa

             


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