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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-06-17 15:24:21瀏覽次數(shù)：275
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50管/48樣 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | AS6321192 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 僅供科研 | 檢測(cè)方法 | 可見(jiàn)分光光度法 |
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 磷脂酶D(PLD)測(cè)試盒50管/48樣 |
檢測(cè)方法 | 可見(jiàn)分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/48樣 |
產(chǎn)品貨號(hào) | AS6321192 |
商品介紹：
測(cè)定意義 磷脂酶D（EC3.1.4.4）即磷脂酰膽堿水解酶，是催化磷酸二酯鍵水解和堿基交換反應(yīng)的一類酶的總稱，廣泛存在于高等動(dòng)植物和細(xì)菌等多種生物體中，具有參與細(xì)胞脂質(zhì)代謝、信號(hào)傳導(dǎo)、生物膜形成的抗逆境脅等生理功能。 測(cè)定原理 磷脂酶D催化水解磷脂酰膽堿末端的磷脂酰二酯鍵生成磷脂酸和膽堿，膽堿在膽堿氧化酶催化作用下生成甜菜堿和過(guò)氧化氫，過(guò)氧化氫在過(guò)氧化氫酶的作用下將4-氨基安替bi林和重蒸酚氧化成粉紅色物質(zhì)，在500nm處有特征吸收峰。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、研缽、超速冷凍離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋，無(wú)水乙醇。 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時(shí)加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時(shí)加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取：按照組織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。 NADH的提取：先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。 |
ADH測(cè)定操作：
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化，分別記錄15s和75s時(shí)吸光值，分別記為A1和A2?！鰽空白管=A1-A2。。
4. 測(cè)定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化，分別記錄15s和75s時(shí)吸光值，分別記為A3和A4?！鰽測(cè)定管=A3-A4。
注意：空白管只需測(cè)定一次。
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。
偽金絲桃英文名： D-Ribose 5-phosphate disodium salt hydrate組受體H1抗體包裝1g
偽原(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： Hematoxylin同源盒蛋白HOXA9抗體包裝5g
委陵菜（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： Adenosine 5‘-monophosphate sodium salt同源盒蛋白HOXB5抗體包裝1g
衛(wèi)矛堿英文名： CTP.Na2肝粘附分子抗體包裝25g
文多靈(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： 5-Methyluridine磷化組蛋白去乙?；?抗體包裝5g
烏金苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： 2,2'-O-Cyclouridine磷化組蛋白去乙?；?抗體包裝5g
烏靈菌粉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： X-gal磷化組蛋白去乙?；?抗體包裝1g
烏梅（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： Fluorescamine磷化HOMER3蛋白抗體包裝25g
烏梢蛇（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： 4-Chloro-1-naphthol (4-CN)轉(zhuǎn)化蛋白p21抗體（原癌基因H-ras抗體）包裝5g
（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： Avidin from egg white轉(zhuǎn)錄因子HES-1抗體包裝100g
英文名： Streptavidin from Streptomyces avidinii組蛋白H4-K4基轉(zhuǎn)移抗體包裝25g
內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： Sitafloxacin HydrateHOMER3蛋白抗體包裝5g
內(nèi)酯英文名： DHBS磷化HER3受體抗體包裝10KU
烏賊墨（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： Disodium beta-glycerophosphate pentahydrate磷化HER4抗體包裝250mg
吳茱萸（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： Fura 2-AM磷化HER4抗體包裝100g
芽孢桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR免白M試劑盒血平;Alserin
AS3.381資源名稱: 米曲霉 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR免疫球蛋白j鏈試劑盒硫長(zhǎng)春質(zhì)堿;Catharanthine
: ivcas7.01200資源名稱: 蘇云金芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品免疫球蛋白G4試劑盒蓮心堿;Liensinine
磷脂酶D(PLD)測(cè)試盒50管/48樣動(dòng)物雙歧桿 對(duì)甲苯酰核糖核酸A1Elisa
巴氏醋桿羅旺亞種 1,1'-雙(二-叔丁基膦基)二茂鐵尿苷二磷酸葡萄糖酸轉(zhuǎn)移Elisa
光帽磷傘 3-硝基芐高爾基體膜蛋白Elisa
芽胞桿 3-乙氧基烯酸復(fù)合型表皮生長(zhǎng)因子樣結(jié)構(gòu)域蛋白8Elisa
尖鐮孢黃瓜專化型（黃瓜枯萎?。?/span> 2-(1-萘基)-5-苯基噁唑低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白2Elisa
多布克魯維酵母 3,4-二氨基血紅蛋白β亞基Elisa
白僵 3-甲酯跨膜受體蛋白Notch-2Elisa
樟疫霉 4-芐氧基-3-苯酸Ⅴ型膠原α2Elisa
醋化醋桿 3-溴甲酯LINGO1Elisa
釀酒酵母 3,5-二溴O-連鎖-N-乙酰葡糖基轉(zhuǎn)移Elisa
檸檬兩面神 2--4-氟-5-DNA甲基轉(zhuǎn)移3LElisa
熱線鏈霉 4-基-3-氟苯酸口腔癌致病基因BPIFB2Elisa
膠孢 3-(丁基苯氨基)錨蛋白Elisa
小孢擬棘殼孢 5,7-二氟-1-印酮脫氫3家族成員A1Elisa
沉積物假海源桿 環(huán)烷酸鈣腎小管間質(zhì)腎炎抗原Elisa
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