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            NAD激酶(NADK)測(cè)試盒50管/24樣

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            • 品牌 其他品牌
            • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
            • 所在地 上海市

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            更新時(shí)間:2022-06-10 15:58:50瀏覽次數(shù):235

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            產(chǎn)品簡(jiǎn)介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50管/24樣
            貨號(hào) AS63212 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
            主要用途 僅供科研 檢測(cè)方法 可見分光光度法
            NAD激酶(NADK)測(cè)試盒50管/24樣公司正在出售的產(chǎn)品:腦腸肽抗體Anti-Nociceptin/FITC 熒光標(biāo)記孤菲肽/痛敏肽抗體IgG
            胰高血糖樣肽-2抗體Anti-Nociceptin receptor/FITC 熒光標(biāo)記孤菲肽受體/痛敏肽受體抗體IgG
            G蛋白偶聯(lián)受體GPR114蛋白抗體Anti-NMP22/FITC 熒光標(biāo)記核基質(zhì)蛋白22抗體IgG
            膠質(zhì)源性連接蛋白抗體An

            詳細(xì)介紹

            商品屬性:

            產(chǎn)品名稱

            NAD激酶(NADK)測(cè)試盒50管/24樣

            檢測(cè)方法

            可見分光光度法

            產(chǎn)品規(guī)格

            50管/24樣

            產(chǎn)品貨號(hào)

            AS63212

            商品介紹:

            測(cè)定意義

            NADK(EC 2.7.1.23)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是目前所發(fā)現(xiàn)的生物體內(nèi)惟一能夠催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶,可催化NAD(H)以ATP或無機(jī)多聚磷酸[poly(P)]作為磷酰基供體進(jìn)行磷酸化反應(yīng),生成NADP(H)。因此,NAD激酶在合成NADP(H)以及調(diào)節(jié)NAD(H)與NADP(H)的平衡上具有重要作用。

            測(cè)定原理

            NADK催化NAD+磷酸化,生成NADP+;NADP+可被6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原為NADPH;NADPH通過PMS的遞氫作用,還原氧化型噻唑藍(lán)(MTT),通過在600 nm下測(cè)定MTT的還原速度(吸光值的變化)可反映出NADK活性的大小。

            需自備的儀器和用品

            可見分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。

            試劑的組成和配制:

            酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。

            自備儀器和用品:

            可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

            NAD+和NADH的提?。?/span>

            1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取

            NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建

            議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);

            冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中

            和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

            NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建

            議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);

            冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中

            和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

            2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span>

            NAD+的提取:按照組織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g

            組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴

            中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

            NADH的提取:按照組織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g

            組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴

            中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和,

            混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

            3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span>

            NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性

            提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液),

            超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min

            (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加

            入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

            NADH的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿

            性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液),

            超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min

            (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加

            入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

            ADH測(cè)定操作:

            1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零。

            2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。

            3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。

            4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4。△A測(cè)定管=A3-A4。

            注意:空白管只需測(cè)定一次。

            注意事項(xiàng):

            ①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

            ②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

            ③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

            ④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

            ⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

            ⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。

            ⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

            ⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。

            ⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。

            粘蛋白/粘液1(MUC1)英文名:MUC1 ELISA Kit血管生成相關(guān)蛋白6抗體包裝1g

            再生基因蛋白1a(REG-1a)英文名:REG-1a ELISA KitMuellerian繆勒管激抑制因子抗體包裝5g

            載脂蛋白H(Apo-H)英文名:Apo-H ELISA Kit酪蛋白激受體A8抗體包裝1g

            載脂蛋白E(Apo-E)英文名:Apo-E ELISA Kit脂肪酰家族成員1抗體包裝5g

            載脂蛋白B48(apo-B48)英文名:apo-B48 ELISA Kit芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白樣2抗體包裝100mg

            載脂蛋白B100(apo-B100)英文名:apo-B100 ELISA Kit磷化芳香N-乙酰化轉(zhuǎn)移抗體包裝1g

            載脂蛋白B100(Apo B100)英文名:Apo B100 ELISA Kit肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白1抗體包裝500mg

            載脂蛋白B(ApoB)英文名:ApoB ELISA Kit粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體包裝5g

            載脂蛋白A5(apo-A5)英文名:apo-A5 ELISA Kit肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白DOC6抗體包裝100mg

            載脂蛋白A1(apo-A1)英文名:apo-A1 ELISA KitAFG3樣蛋白2/脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白28抗體包裝500mg

            載脂蛋白A1(Apo A1)英文名:Apo A1 ELISA Kit激活受體相互作用蛋白1抗體包裝1g

            孕受體(PROGR)英文名:PROGR ELISA Kit固類還原家族7成員A2抗體包裝5g

            (PROG)英文名:PROG ELISA Kit蛋白激AKT1,2,3抗體包裝25g

            孕激/孕(PROG)英文名:PROG ELISA Kit帕金森病相關(guān)蛋白ATP13A2抗體包裝5g

            誘導(dǎo)型一氧化合成(iNOS)英文名:iNOS ELISA Kit肌側(cè)索硬化蛋白2抗體包裝100g

            繆勒激2型受體抗體Ⅱ型膠原(COL2)AT-406 是一種有效的,可口服的 Smac 模擬物,為 IAPs 的拮抗劑,能夠抑制 XIAP,cIAP1 和 cIAP2 蛋白,Ki 值分別為 66.4,
            NAD激酶(NADK)測(cè)試盒50管/24樣空泡單胞 N-2-乙?;BⅠ型前膠原羧基端肽Elisa

            都柏林沙門氏 肝瓊脂糖凝膠CL-6BⅡ型肺泡表面抗原Elisa

            畢赤酵母屬 聚氧乙烯氫化Ⅱ型膠原C端肽Elisa

            枯草芽孢桿 (-)-莰Ⅱ型膠原抗體Elisa

            肉座屬 牛肉浸粉Ⅲ型膠原蛋白Elisa

            少根根霉 油酸乙酯Ⅲ型前膠原氨基端肽Elisa

            大腸埃希氏○抗原微量凝集定型血清診斷液 ○106 3'-甲氧基-5'-羥基異黃酮-7-O-β-D-葡萄糖苷Ⅳ型膠原Elisa

            釀酒酵母 Ⅳ型膠原蛋白Elisa

            殼多胞屬 鼠尾草酸Elisa

            粗壯假絲酵母 蜂膠Ⅸ型膠原蛋白Elisa

            運(yùn)動(dòng)節(jié)桿 甲基紫精adropinElisa

            枯草芽孢桿 月桂聚氧乙烯硫酸鈉AKT蛋白Elisa

            Pseudomonas argentinensis DA201-C樹脂AP2A2Elisa

            馬腺疫鏈球獸疫亞種 1,1-二苯基-2-苦基肼脂肪炎癥因子Elisa

            枯草芽孢桿 長(zhǎng)春apelin 12Elisa

             


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