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            A培養(yǎng)基緩沖液

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            更新時(shí)間:2022-07-04 13:13:50瀏覽次數(shù):187

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            產(chǎn)品簡(jiǎn)介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 500ml
            貨號(hào) FS-R6438 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
            主要用途 僅供科研 貨號(hào) FS-R6438
            A培養(yǎng)基緩沖液公司正在銷售的產(chǎn)品:兔CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白γ(C/EBPγ)試劑盒 Anti-CKAP5 Antibody腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白2抗體
            兔周期素依賴性激酶4(CDK4)試劑盒 Anti-CKB Antibody蛋白酶調(diào)解因子7抗體
            兔熱休克蛋白20(HSPβ6/HSP-20)試劑盒 Anti-Clathrin heavy chain/CLTC Antibody磷酸化增殖核抗原

            詳細(xì)介紹

            產(chǎn)品分類:培養(yǎng)基

            儲(chǔ)存條件  4℃,6個(gè)月

            用途  配制培養(yǎng)基的緩沖液

            注意事項(xiàng)  無(wú)菌溶液。主要由磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、硫酸銨、檸檬酸鈉等組成,經(jīng)高壓滅菌處理。

            公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購(gòu)!

            產(chǎn)品名稱

            規(guī)格

            貨號(hào)

            A培養(yǎng)基緩沖液

            500ml

            FS-R6438

             

            63.jpg 

             

            配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:

            1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;

            EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

            2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

            配制步驟:

            1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來(lái)水、純水洗凈,烘干、冷卻。

            2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

            3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。

            13.jpg 

             

            實(shí)驗(yàn)方法與判定:

            1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

            2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。

            3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測(cè)器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

            4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái),保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

            使用方法:

            1.  常用篩選濃度

            注意:用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來(lái)確定最佳篩選濃度。

            一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

            2. 殺滅曲線的建立

            注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過(guò)建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來(lái)實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。

            1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過(guò)夜;注:對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量。

            2)  根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

            3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

            4)  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

            5)  按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

            3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

            1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

            注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

            2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

            3)  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

            4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

            5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

            跨膜絲蛋白2(TMPRSS2)TMPRSS2 ELISA Kit活化半胱蛋白蛋白3抗體包裝25g

            跨膜蛋白27(TMEM27)TMEM27 ELISA Kit7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框61抗體包裝5g

            克細(xì)胞蛋白16(CC16)CC16 ELISA Kit少突膠質(zhì)跨膜蛋白抗體包裝1g

            可溶性半乳糖凝集3結(jié)合蛋白(LGALS3BP)LGALS3BP ELISA Kit激分子B7-1蛋白抗體包裝1g

            顆粒體蛋白(GRN)GRN ELISA Kit末端補(bǔ)體復(fù)合物抗體包裝250mg

            顆粒M(GZMM)GZMM ELISA Kit8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框55抗體包裝25g

            顆粒K(GZMK)GZMK ELISA Kit補(bǔ)體C4a+C4b蛋白抗體包裝5g

            顆粒B(GZMB)GZMB ELISA KitCD44V7抗體包裝100g

            顆粒A(GZMA)GZMA ELISA KitCD44V10抗體包裝25g

            抗增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)PCNA ELISA KitCD44V4抗體包裝1g

            抗凝血(AT)AT ELISA Kit緊密連接蛋白4抗體包裝25g

            抗繆勒管激(AMH)AMH ELISA Kit6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框140抗體包裝5g

            抗尿激(ADH)ADH ELISA KitL型鈣通道蛋白抗體包裝100g

            抗酒石性磷(ACP5)ACP5 ELISA Kit電壓依賴性鈣通道Cav3.1抗體包裝25g

            抗肌蛋白(UTRN)UTRN ELISA Kit緊密連接蛋白3抗體包裝5g

            : AS1.3221資源名稱: 約氏乳桿菌 質(zhì)量規(guī)格:含量> 99%,BR,可用于培養(yǎng)酯酰甘油激ζ試劑盒梓;Catalpol

            多粘類芽胞桿菌Paenibacillus│polymyxa 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于培養(yǎng)脂氧A4試劑盒知母皂苷 BⅡ;Timosaponin

            藍(lán)色犁頭霉Absidia│coerulea 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品脂聯(lián)受體2試劑盒梔子苷;Geniposide
            A培養(yǎng)基緩沖液HER2 receptor(NT)/FITC  熒光標(biāo)記抗c-erbB-2受體(N端)IgG 光譜純, ≥99.8%

            HER2 receptor/FITC  熒光標(biāo)記抗HER2受體IgG for DNA synthesis, ≥99.9% (GC)

            HER2 receptor/FITC  熒光標(biāo)記抗c-erbB-2受體IgG 梯度級(jí), for HPLC, ≥99.9%

            Phospho-HER2(Tyr1221/1222)/FITC  熒光標(biāo)記化HER2受體IgG 無(wú)水級(jí), 99.9%,H2O≤ppm

            Phospho-HER2(Tyr1112) /FITC  熒光標(biāo)記化HER2受體IgG無(wú)水H2O:20-30ppm

            Phospho-HER2(Tyr1248) /FITC  熒光標(biāo)記化HER2受體IgG無(wú)水 無(wú)水級(jí), 99.8%,H2O:30-50ppm

            Phospho-HER2 (Tyr877)/FITC  熒光標(biāo)記化HER2受體IgGN,N-二酰 無(wú)水級(jí), 99.8%

            HER3/ErbB3 /FITC  熒光標(biāo)記HER3受體IgG酯 ACS, ≥99.5%


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