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            上海撫生實業(yè)有限公司>>滴定緩沖溶液>>免疫組化>>Tris-Maleate緩沖液

            Tris-Maleate緩沖液

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            • 所在地 上海市

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            更新時間:2022-07-28 14:46:38瀏覽次數(shù):393

            聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

            產(chǎn)品簡介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 500ml
            貨號 FS-R7200 應用領域 化工
            主要用途 僅供科研 貨號 FS-R7200
            Tris-Maleate緩沖液公司正在銷售的產(chǎn)品:人生長調(diào)節(jié)致癌基因α(GROα/CXCL1)試劑盒 Anti-LDB2 Antibody人膜粘連蛋白 Ⅱ ELISA 試劑盒
            人粒趨化蛋白2(GCP-2)試劑盒Anti-LDB1 Antibody小鼠膽堿磷酸甘油酯
            人白介素8(IL-8)試劑盒Anti-LDLRAD2 Antibody大鼠膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶
            人10kDa干擾素γ誘導蛋白(IP-10/

            詳細介紹

            產(chǎn)品分類:免疫組化

            儲存條件:室溫,12個月

            用途:免疫組化和染色中的常規(guī)緩沖液

            注意事項:主要由馬來酸/順丁烯二酸溶液、TRIS水溶液、氫氧化鈉溶液按不同比例混合而成,獲得相應PH值。pH值可選5.08,5.3,5.52,5.7,5.88,6.05,6.27,6.5,6.86,7.2,7.5,7.75,7.97,8.15,8.3,8.45。

            公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

            產(chǎn)品名稱

            規(guī)格

            貨號

            Tris-Maleate緩沖液

            500ml

            FS-R7200

             

            63.jpg 

             

            配制與標定的實驗原理:

            1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;

            EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

            2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

            配制步驟:

            1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

            2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

            3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。

            13.jpg 

             

            實驗方法與判定:

            1.對照品溶液的穩(wěn)定性

            2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

            3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。

            4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

            使用方法:

            1.  常用篩選濃度

            注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。

            一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

            2. 殺滅曲線的建立

            注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。

            1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

            2)  根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

            3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

            4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

            5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

            3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

            1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

            注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

            2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

            3)  篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

            4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

            5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

            鏈格孢菌叉頭蛋白O3A抗體Human AGPS (Alkyldihydroxyacetonephosphate synthase, peroxisomal) ELISA KIT綿羊白蛋白(Albumin)免疫試劑盒

            尖鱗黃傘卵泡相關蛋白1Human AIF1L (Allograft inflammatory factor 1-like) ELISA KIT綿羊γ干擾(IFN-γ)免疫試劑盒

            (疣孢漆斑菌)成纖維生長因子受體5抗體Human AMER1 (APC membrane recruitment protein 1) ELISA KIT綿羊C反應蛋白(CRP)免疫試劑盒

            硬結桿菌磷化粘著斑激抗體Human ADSSL1 (Adenylosuccinate synthetase isozyme 1) ELISA KIT綿羊5羥色/血清/血清(5HT/ST)免疫試劑盒

            擬盤多毛孢屬磷化粘著斑激抗體Human AMBN (Ameloblastin) ELISA KIT綿羊5羥二十碳四烯(5-HETE)免疫試劑盒

            干草鞘單胞菌口蹄疫病A型抗體Human ADRB2 (Beta-2 adrenergic receptor) ELISA KIT綿羊3-硝基酪(3-NT)免疫試劑盒

            植物乳桿菌FBXO28蛋白抗體Human AAGAB (Alpha- and gamma-adaptin-binding protein p34) ELISA KIT綿羊Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)免疫試劑盒

            釀酒酵母FBXW5蛋白抗體Human ALMS1 (Alstrom syndrome protein 1) ELISA KIT綿羊17羥孕(17-OHP)免疫試劑盒

            土地芽孢桿菌FBXW12蛋白抗體Human ADRA1D (Alpha-1D adrenergic receptor) ELISA KIT貓

            根瘤菌FBXO42蛋白抗體Human AMDHD1 (Probable imidazolonepropionase) ELISA KIT貓腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒

            貝酵母FasL抗體Human ADIG (Adipogenin) ELISA KIT貓孕激/孕(PROG)免疫試劑盒

            肇慶曲霉原纖維蛋白1抗體Human ARFGEF1 (Brefeldin A-inhibited guanine nucleotide-exchange protein 1) ELISA KIT貓游離狀腺原(Free-T3)免疫試劑盒

            秦氏蜜環(huán)菌胰腺衍生因子抗體Human FDX1L (Adrenodoxin-like protein, mitochondrial) ELISA KIT貓游離甲狀腺(FT4)免疫試劑盒

            煙曲霉性成纖維生長因子抗體Human ADPRH ([Protein ADP-ribosylarginine] hydrolase) ELISA KIT貓血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)免疫試劑盒

            硬結節(jié)桿菌8/第八/第八因子相關抗原抗體Human RRM2(Ribonucleoside-diphosphate reductase subunit M2) ELISA Kit貓?zhí)剪?(CA9)免疫試劑盒

            假結合棒桿菌8/第八/第八因子相關抗原抗體Human ABR (Active breakpoint cluster region-related protein) ELISA KIT貓嗜粒趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)免疫試劑盒

            青銅小單孢菌Micromonospora│chalcea 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.0%(GC)補骨脂二氫黃

            泡波曲霉屬Emericella│sp. 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5%(GC)補骨脂定

            小菌核菌Sclerotium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品表兒茶
            Tris-Maleate緩沖液Human macrophage stimulating protein,MSP ELISA Kit  人巨噬細胞刺激蛋白規(guī)格: 48T

            Human mammalian target of rapamyein,mTOR ELISA Kit  人雷帕霉su靶蛋白規(guī)格: 48T

            Human Nuclear matrix protein 22,NMP-22 ELISA Kit  人核基質(zhì)蛋白22規(guī)格: 48T

            Human cartilage oligomeric protein,COMP ELISA Kit  人軟骨寡聚蛋白規(guī)格: 48T

            Human multidrug resistance-associated protein,MRP ELISA Kit   人多藥耐藥相關蛋白規(guī)格: 48T


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