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            上海撫生實業(yè)有限公司>>滴定緩沖溶液>>免疫組化>>APES防脫劑

            APES防脫劑

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            • 所在地 上海市

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            更新時間:2022-07-28 14:40:13瀏覽次數(shù):422

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            產(chǎn)品簡介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10ml
            貨號 FS-R7196 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
            主要用途 僅供科研 貨號 FS-R7196
            APES防脫劑公司正在銷售的產(chǎn)品:甲酰甲硫(fMet)試劑盒 Anti-KRT10 Antibody小鼠L選擇素
            可替丁(Cotinine)試劑盒Anti-KRT17 Antibody豚鼠卵清蛋白特異性IgG
            雌二(E2)試劑盒Anti-KRT13 Antibody大鼠活化素A受體抗體
            前列腺素D2(PGD2)試劑盒Anti-KRT16 Antibody豚鼠白介素4
            P物質(zhì)(SP)試劑盒Anti

            詳細介紹

            產(chǎn)品分類:免疫組化

            儲存條件:室溫,12個月

            用途:玻片的硅化,包括蓋玻片和載玻片

            注意事項:主要由APES組成。

            公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

            產(chǎn)品名稱

            規(guī)格

            貨號

            APES防脫劑

            10ml

            FS-R7196

             

            63.jpg 

             

            配制與標定的實驗原理:

            1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;

            EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

            2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

            配制步驟:

            1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

            2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

            3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。

            13.jpg 

             

            實驗方法與判定:

            1.對照品溶液的穩(wěn)定性

            2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

            3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。

            4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

            使用方法:

            1.  常用篩選濃度

            注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。

            一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

            2. 殺滅曲線的建立

            注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。

            1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

            2)  根據(jù)細胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

            3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

            4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

            5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

            3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

            1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

            注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

            2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

            3)  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

            4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

            5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

            黑曲霉FAM13B1蛋白抗體Human BCDIN3D (Pre-miRNA 5′-monophosphate methyltransferase) ELISA KIT綿羊游離狀腺原(Free-T3)免疫試劑盒

            側(cè)孢短芽孢桿菌巖藻糖轉(zhuǎn)移8抗體Human BCL10 (B-cell lymphoma/leukemia 10) ELISA KIT綿羊游離甲狀腺(FT4)免疫試劑盒

            長枝木霉卵泡激結(jié)合蛋白1抗體Human BNIPL (Bcl-2/adenovirus E1B 19 kDa-interacting protein 2-like protein) ELISA KIT綿羊胰島樣生長因子1(IGF-1)免疫試劑盒

            棱柱散尾菌相互作用蛋白FHL2抗體Human ABCC11 (ATP-binding cassette sub-family C member 11) ELISA KIT綿羊胰島(INS)免疫試劑盒

            枯草芽胞桿菌脂肪去飽和1抗體Human ATRN(Attractin) ELISA Kit綿羊一氧化氮合成2,誘導(dǎo)型(NOS2)免疫試劑盒

            糞腸球菌回腸脂肪結(jié)合蛋白抗體Human BNC1 (Zinc finger protein basonuclin-1) ELISA KIT綿羊血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒

            不動桿菌屬脂肪型脂肪結(jié)合蛋白Human BTF3L4 (Transcription factor BTF3 homolog 4) ELISA KIT綿羊血管生成2(ANG-2/ANGPT2)免疫試劑盒

            枯草芽孢桿菌脂肪酰還原2抗體Human BSPRY (B box and SPRY domain-containing protein) ELISA KIT綿羊褪黑(MT)免疫試劑盒

            巨大芽胞桿菌脆性X相關(guān)蛋白樣2抗體Human BCDIN3D (Pre-miRNA 5′-monophosphate methyltransferase) ELISA KIT綿羊銅藍蛋白(CP)免疫試劑盒

            根瘤菌脂肪酰水解2抗體Human ATP2A1 (Sarcoplasmic/endoplasmic reticulum calcium ATPase 1) ELISA KIT綿羊甜菜堿-同型半胱S-甲基轉(zhuǎn)移1(BHMT)免疫試劑盒

            豇豆慢生根瘤菌卷曲蛋白FZD7抗體Human DIO3(Type III iodothyronine deiodinase) ELISA Kit綿羊髓過氧化物(MPO)免疫試劑盒

            布蘭克假絲酵母口蹄疫病A型抗體Human ABCA4 (Retinal-specific ATP-binding cassette transporter) ELISA KIT綿羊雙氫睪(DHT)免疫試劑盒

            巨大芽孢桿菌磷化粘著斑激抗體Human BCL10 (B-cell lymphoma/leukemia 10) ELISA KIT綿羊生長激(GH)免疫試劑盒

            金龜子綠僵菌抗體Human APITD1 (Centromere protein S) ELISA KIT綿羊狀腺原(T3)免疫試劑盒

            蘇云金芽孢桿菌溫泉亞種鋅指蛋白798抗體Human ALOX5AP (Arachidonate 5-lipoxygenase-activating protein) ELISA KIT綿羊溶菌(LZM)免疫試劑盒

            黑曲霉肽基脯酰順反異構(gòu)FKBP10抗體Human DIO3(Type III iodothyronine deiodinase) ELISA Kit綿羊熱休克蛋白70(HSP-70)免疫試劑盒

            克氏梭菌Clostridium│kluyveri 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5%(GC)沒食子酯

            繩狀青霉Penicillium│funiculosum Thom 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.0%蘆薈寧

            枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,>99%(GC)L-亮(白)
            APES防脫劑Human orosomucoid,ORM ELISA Kit  人類粘蛋白規(guī)格: 48T

            Human Elastin,ELN ELISA Kit  人彈性蛋白規(guī)格: 48T

            Human Involucrin,iNV ELISA Kit  人套膜蛋白規(guī)格: 48T

            Human tenascin-R,TN-R ELISA Kit  人肌腱蛋白R規(guī)格: 48T

            Human growth-associated protein 43,GAP-43 ELISA Kit  人生長相關(guān)蛋白43規(guī)格: 48T


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