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CY7.5-N3 是一種帶有疊氮基(-N3)的熒光染料,常用于點擊化學反應。在制作過程中,需注意以下幾點:首先,反應環(huán)境應避免還原劑,因為疊氮基易被還原失活。其次,反應溫度一般控制在室溫至37°C,避免高溫導致染料分解。此外,反應溶液的pH值應嚴格控制在6.5-7.5之間,過高或過低的pH值均會影響疊氮基的活性。在使用時,CY7.5-N3 可通過與炔基(-C≡C-)修飾的生物分子進行點擊化學反應。例如,與蛋白質(zhì)上的炔基側(cè)鏈反應。標記完成后,需通過凝膠過濾或透析等方法去除未反應的染料。標記后的生物分子可用于熒光成像、流式細胞術(shù)等檢測,但需注意避光保存,以防止熒光淬滅。
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