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目的：觀察40%乙醇灌胃對(duì)小鼠缺氧耐受性的影響。方法：將ICR小鼠分為乙醇組和對(duì)照組，分別以40%乙醇、生理鹽水灌胃，將2組鼠置于密閉瓶?jī)?nèi)記錄存活時(shí)間，比較組間平均存活時(shí)間的差異，記錄乙醇組進(jìn)入醉酒與醉酒持續(xù)時(shí)間、并觀察乙醇灌胃后小鼠心率和呼吸的變化。結(jié)果：以40%乙醇灌胃后實(shí)驗(yàn)組小鼠平均存活時(shí)間較對(duì)照組顯著延長(zhǎng)（p<0.01）；實(shí)驗(yàn)組灌胃后約13.11分鐘進(jìn)入醉酒狀態(tài)，同時(shí)心率和呼吸頻率均較對(duì)照組明顯下降（p<0.05）。結(jié)論：以40%乙醇灌胃能明顯提高小鼠對(duì)缺氧的耐受性，耐受性的提高可能與醉酒后活動(dòng)降低、心率降低等造成的耗氧減少有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】  缺氧耐受性  乙醇  心電圖  小鼠
【中圖分類(lèi)號(hào)】R965                  【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A                    【文章編號(hào)】2095-1752（2013）11-0046-02
        缺氧是造成細(xì)胞損傷的常見(jiàn)的原因，其發(fā)生與休克、心力衰竭、呼吸衰竭等病理過(guò)程及綜合征密切相關(guān)，是引起機(jī)體功能和代謝異常的基本機(jī)制之一。而飲酒也是日常生活中常見(jiàn)的現(xiàn)象，醉酒駕車(chē)造成的交通意外往往使人們較多關(guān)注酒精對(duì)于機(jī)體功能的影響，尤其是對(duì)心臟、肝臟等組織器官結(jié)構(gòu)與功能的影響方面[1-2]，醉酒對(duì)機(jī)體缺氧時(shí)的耐受性是否有影響尚少有研究。本實(shí)驗(yàn)旨在探討在醉酒的情況下小鼠的缺氧耐受性的變化，并動(dòng)態(tài)觀察心電圖等的改變，分析醉酒后缺氧耐受性變化的可能機(jī)制。 
        1  材料和方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        健康成年ICR小鼠100只，雌性51只，雄性49只，體重(20±2)g，購(gòu)自蘇州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。
        1.2儀器與試劑
        Medlbab生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)（南京美易科技有限公司），電子天平，廣口瓶(125mL)，鈉石灰（上海五四化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)110118），無(wú)水乙醇，0.9%氯化鈉注射液。
        1.3 方法
        1.3.1 40%乙醇灌胃對(duì)小鼠缺氧耐受性的影響
        54只小鼠隨機(jī)分為兩組：乙醇組30只、生理鹽水對(duì)照組24只，每組雌雄各半。實(shí)驗(yàn)前12h停止給小鼠喂食（以下實(shí)驗(yàn)喂食相同）。按0.15ml/10g體重的量，以40%的乙醇溶液[3]給乙醇組小鼠灌胃、以生理鹽水給對(duì)照組小鼠灌胃，立即所有小鼠置于含30g鈉石灰的廣口瓶?jī)?nèi)，蓋緊瓶塞，記錄小鼠存活時(shí)間。
        1.3.2 40%乙醇灌胃對(duì)小鼠心電圖的影響觀察
        22只小鼠隨機(jī)分為2組：40%乙醇組12只和生理鹽水對(duì)照組10只，每組雌雄各半。
        在安靜、光線柔和及25℃的實(shí)驗(yàn)室中，打開(kāi)心電測(cè)量裝置，預(yù)熱30min。按上面1.3.1所述，分別以40%乙醇溶液或生理鹽水溶液給兩組小鼠灌胃，立即將小鼠仰臥位固定于木制小鼠解剖臺(tái)上，針狀電極插入兩前肢及左后肢遠(yuǎn)心側(cè)皮下，連接Medlab生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)，每隔5min自動(dòng)描記小鼠心電圖，每次連續(xù)采樣5sec。
        1.3.3 40%乙醇灌胃對(duì)小鼠醉酒狀態(tài)及呼吸活動(dòng)的影響觀察
        24只小鼠隨機(jī)分為2組：40%乙醇組13只（雌性7只，雄性6只）和生理鹽水對(duì)照組11只（雌性6只，雄性5只）。先計(jì)數(shù)各鼠呼吸頻率，再按上面1.3.1所述，分別以40%乙醇或生理鹽水給兩組小鼠灌胃，以小鼠翻正反射消失判斷為醉酒，在醉酒狀態(tài)下每隔10min計(jì)數(shù)呼吸頻率，取平均值。生理鹽水組計(jì)數(shù)灌胃后10min、20min和30min的呼吸頻率，取平均值。
        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
        統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SAS9.1軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析。采用t檢驗(yàn)分析兩組間差異，方差不齊者采用秩和檢驗(yàn)分析，P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
        2  結(jié)果
        2.1 40%乙醇灌胃對(duì)小鼠缺氧存活時(shí)間的影響（表1）
        表1  40%乙醇灌胃對(duì)小鼠缺氧存活時(shí)間的影響（x-±s）
        
        ﹡ 與生理鹽水組比較：P<0.01
        結(jié)果表明，40%乙醇灌胃后小鼠在缺氧情況下存活時(shí)間顯著長(zhǎng)于生理鹽水對(duì)照組，p值<0.01，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而雌、雄性小鼠間的存活時(shí)間無(wú)顯著差異。
        2.2 40%乙醇灌胃對(duì)小鼠心率的影響（圖1）
        
        ﹡與灌胃后5min比較：P<0.05；△與生理鹽水組比較：P<0.05
        圖1  40%乙醇灌胃對(duì)小鼠心率的影響
        由圖1可見(jiàn)， 40%乙醇組在灌胃后15min心率下降，尤其在30min后明顯低于生理鹽水對(duì)照組（P<0.05）；組內(nèi)比較，以40%乙醇灌胃后5min時(shí)的心率作為對(duì)照，25min、30min、35min、40min時(shí)的心率明顯降低，且差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。
        1.3  40%乙醇灌胃對(duì)小鼠醉酒狀態(tài)及呼吸活動(dòng)的影響
        小鼠以40%乙醇灌胃后平均13.11±7.59min進(jìn)入醉酒狀態(tài)，醉酒持續(xù)時(shí)間平均112.67±35.06min。對(duì)灌胃后兩組小鼠呼吸頻率計(jì)數(shù)結(jié)果見(jiàn)表2。
        表2  40%乙醇灌胃對(duì)小鼠呼吸的影響（x-±s）
        
        ﹡與生理鹽水組比較：P<0.05；△與灌胃前比較P<0.05
        由表2結(jié)果顯示，灌胃前，兩組間呼吸無(wú)明顯差異，而乙醇灌胃后小鼠呼吸頻率顯著低于生理鹽水對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。并且40%乙醇灌胃前后的呼吸頻率亦有差異，灌胃后小鼠呼吸顯著減慢（P<0.05）?？梢?jiàn)到小鼠醉酒后呼吸深度加深。
        3  討論
        缺氧是常見(jiàn)的病理過(guò)程之一，也是造成細(xì)胞損傷的常見(jiàn)原因。機(jī)體缺氧耐受性的高低與代謝耗氧率和機(jī)體的代償能力有關(guān)，耗氧率高者缺氧耐受性差。許多因素能夠影響到機(jī)體的耗氧率，如中樞神經(jīng)活動(dòng)、體溫和心率等，而本文則研究乙醇對(duì)于小鼠缺氧耐受性的影響。
        實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，40%乙醇灌胃確能顯著延長(zhǎng)小鼠在缺氧狀態(tài)下的存活時(shí)間，提示其能提高小鼠對(duì)缺氧的耐受性。分析40%乙醇灌胃后不同性別小鼠間缺氧耐受性的差別，雖雌鼠存活時(shí)間有長(zhǎng)于雄性小鼠的傾向，但尚無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
        為分析40%乙醇灌胃提高小鼠缺氧耐受性的可能機(jī)制，通過(guò)動(dòng)態(tài)描記小鼠灌胃后540min的心電圖，進(jìn)一步分析后小鼠心率的變化。結(jié)果顯示，40%乙醇灌胃后小鼠心率明顯減慢，心率減慢可使心肌耗氧量有所減少。對(duì)給乙醇后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物心率的變化，不同學(xué)者的研究結(jié)果不盡相同，有的顯示急性乙醇中毒后可使心率加快[5]，也有報(bào)道對(duì)心率無(wú)明顯影響[6]，可能與實(shí)驗(yàn)對(duì)象、乙醇的濃度、用量、給予途徑和觀察時(shí)間等多因素有關(guān)。
        本實(shí)驗(yàn)在醉酒狀態(tài)下觀察到小鼠呈現(xiàn)深慢呼吸，提示呼吸活動(dòng)的耗氧量可能并未顯著減少，而小鼠處于安靜狀態(tài)，肢體自主活動(dòng)顯著減少，心率減慢等與中樞神經(jīng)活動(dòng)受抑制有關(guān)。因而乙醇灌胃后，小鼠缺氧耐受性的提高應(yīng)與中樞神經(jīng)活動(dòng)受抑制、心臟活動(dòng)減弱以及四肢肌肉運(yùn)動(dòng)減少使總耗氧量減少有關(guān)。
        本研究發(fā)現(xiàn)給予40%乙醇能顯著延長(zhǎng)小鼠缺氧時(shí)的存活時(shí)間并動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)此過(guò)程引起的小鼠心率和呼吸的變化，類(lèi)似結(jié)果較少見(jiàn)到文獻(xiàn)報(bào)道。這為研究乙醇對(duì)于機(jī)體的影響打開(kāi)了一個(gè)新的視角。
        此外，目前在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，缺氧耐受性實(shí)驗(yàn)常采用氯丙嗪結(jié)合低溫的方法觀察其對(duì)小鼠缺氧耐受性的影響，但往往難以取得滿意而穩(wěn)定的效果，選用其他臨床使用的麻醉劑又因家對(duì)麻醉藥管控制度造成來(lái)源的困難。本文以乙醇灌胃來(lái)建立模型具有簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)、結(jié)果穩(wěn)定的優(yōu)點(diǎn)，可為基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中缺氧耐受性的觀察提供新的模型，具有明顯的實(shí)用價(jià)值。

參考文獻(xiàn)
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江蘇省高等教育改革課題（編號(hào)：SG315935）