酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)已經(jīng)成為實驗室常用的檢測蛋白含量變化的實驗技術(shù),常用的檢測方法是用抗原包被孔板,然后用一抗和二抗檢測抗原的變化。這里使用兩種抗體的原因一方面是信號放大的需要,另一方面是要減少成本。假如每種抗體都用酶或者熒光素標記的話,那將會需要多少種標記的抗體呢?而且可以肯定價格一定不菲。而用標記二抗的方法就可以大大減少需要標記抗體的數(shù)目,同時也能提高標記抗體的效用,這樣就能用盡量少的標記抗體滿足盡量多的實驗要求。
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乙酰膽堿酯酶ELISA試劑盒,本應(yīng)用試劑盒已完成多中心臨床驗證,并通過國家食藥監(jiān)總局的認證。我司通過建立覆蓋歐美的采購中心,與歐美1000多個品牌建立了正式的代理與合作,涵蓋所有的生物試劑門類,特別是二三線高質(zhì)量品牌產(chǎn)品,具有壓倒性地優(yōu)勢。產(chǎn)品領(lǐng)域:分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)、細菌學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白質(zhì)學(xué)、細胞治療、臨床應(yīng)用等領(lǐng)域。主營產(chǎn)品:流式抗體、ELISA試劑盒、標準品和對照品、生化試劑、抗體和抗原、細胞因子、技術(shù)服務(wù)、實驗耗材和消耗品、儀器設(shè)備。
引起 ELISA 測定結(jié)果與文獻報導(dǎo)不一致的原因主要有三點,試劑因素、標本因素和操作因素。試劑因素:1. 試劑應(yīng)選擇靈敏度高、特異性好、穩(wěn)定性好、批間差小、操作方便的試劑。 2.不同廠家的試劑一定不能混用,包括底物和洗滌液。由于校準標準有差異,還有抗體、檢測方法、試劑、交叉反應(yīng)等因素都會導(dǎo)致對樣本的檢測結(jié)果不一致。如:有的廠家酶標板孔間 CV 值大于 20%,標記酶的活性及顯色液的穩(wěn)定性比較差,使用劣質(zhì)的試劑必然導(dǎo)致結(jié)果的假陽性或假陰性。 3. 要注意試劑的批號和出廠日期,雖然試劑的有效期多為 1 年,好選擇剛出廠的試劑盒。 4. 避免選擇假的 ELISA 試劑盒。有些廠家為夸大生產(chǎn) ELISA 的指標范圍,用一種指標來冒充其它指標,造成各種種屬、各種指標都可以做的假象。標本因素和操作因素:血清是常用的 ELISA 標本,血漿一般可視為與血清同等的標本,標本引起的假陽性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致,分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種。 內(nèi)源性物質(zhì):有人認為大約 40%的人血清標本中含有非特異性干擾物質(zhì),可以不同程度影響檢測結(jié)果。常見的干擾物質(zhì)有:類風(fēng)濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠 Ig (s) 抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。外源性物質(zhì):外源性物質(zhì)常常是由于用于 ELISA 測定的血標本的采集、貯存等不當(dāng)所致。如標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存過久、標本凝集不全和采血管中添加物等影響。
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編輯:小檀20181009
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