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            人生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin試劑盒

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            品       牌:其他品牌

            廠(chǎng)商性質(zhì):生產(chǎn)商

            所  在  地:上海市

            更新時(shí)間:2025-03-11 12:41:02瀏覽次數(shù):529

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            人生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin試劑盒,運(yùn)用雙抗體夾心法,可精準(zhǔn)定量血清等樣本中 ghrelin,常用于科研,助力探究其與多種生理病理的關(guān)聯(lián) 。

            人生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin試劑盒

            人生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin試劑盒,?;诿嘎?lián)免疫吸附法(ELISA),以雙抗體夾心法為原理。其核心在于用純化的 ghrelin 抗體包被微孔板,制成固相抗體。當(dāng)加入樣本后,樣本中的 ghrelin 會(huì)與固相抗體特異性結(jié)合 ,接著加入 HRP 標(biāo)記的 ghrelin 抗體,形成抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體復(fù)合物。添加底物 TMB,在 HRP 酶的催化下,TMB 轉(zhuǎn)化為藍(lán)色,遇酸變?yōu)辄S色,顏色深淺與 ghrelin 含量正相關(guān),借助酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度(OD 值),依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)就能精準(zhǔn)計(jì)算出樣本中 ghrelin 的濃度 。


            試劑盒通常包含酶聯(lián)板、標(biāo)準(zhǔn)品(多為凍干品,使用時(shí)需以樣品稀釋液溶解并稀釋?zhuān)?、樣品稀釋液、檢測(cè)稀釋液 A、檢測(cè)稀釋液 B、檢測(cè)溶液 A、檢測(cè)溶液 B、底物溶液、濃洗滌液(使用時(shí)需按比例稀釋?zhuān)?、終止液、覆膜及詳細(xì)的使用說(shuō)明書(shū) 。


            對(duì)樣本類(lèi)型要求較為寬泛,血清樣本需全血室溫放置 2 小時(shí)或 4℃過(guò)夜后,1000×g 離心 20 分鐘取上清;血漿可用 EDTA 或肝素抗凝,采集后 30 分鐘內(nèi),1000×g 離心 15 分鐘取上清;組織勻漿需先以預(yù)冷 PBS 沖洗組織,去除殘留血液,剪碎后按比例加入 PBS 研磨,再 5000×g 離心 5 - 10 分鐘取上清;細(xì)胞培養(yǎng)上清則以 1000×g 離心 20 分鐘除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。其它生物樣本一般 1000×g 離心 20 分鐘取上清。標(biāo)本置 4℃保存應(yīng)小于 1 周, - 20℃或 - 80℃均應(yīng)密封保存,且要避免反復(fù)凍融,溶血標(biāo)本不宜用于檢測(cè) 。


            操作時(shí),先將試劑盒及樣本平衡至室溫。加樣環(huán)節(jié),設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔,空白孔加樣品稀釋液,其余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品,輕輕混勻后 37℃反應(yīng) 120 分鐘 。之后棄去液體,每孔加檢測(cè)溶液 A 工作液,37℃反應(yīng) 60 分鐘,洗板 3 次。接著加檢測(cè)溶液 B 工作液,37℃反應(yīng) 60 分鐘,再洗板 5 次。隨后加入底物溶液,37℃避光顯色,在顏色呈現(xiàn)明顯梯度時(shí)加入終止液,此時(shí)藍(lán)色迅速轉(zhuǎn)為黃色。最后在加終止液后立即用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)處測(cè)量各孔 OD 值,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中 ghrelin 濃度 。


            該試劑盒主要應(yīng)用于科研領(lǐng)域,助力研究人員探究 ghrelin 與肥胖、糖尿病、心血管疾病等多種生理病理狀態(tài)的關(guān)聯(lián),也能作為評(píng)估特定干預(yù)措施對(duì) ghrelin 水平影響的有效工具 。


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