1861年，法國(guó)化學(xué)家兼生物學(xué)家巴斯德(1822--1895)用實(shí)驗(yàn)證明了有機(jī)物的腐敗和發(fā)酵是微生物作用的結(jié)果。英國(guó)愛(ài)丁堡醫(yī)生李斯得（1827--1912）據(jù)此提出了的制腐法（Antisepsis），即用石碳酸溶液消毒手術(shù)部及手術(shù)室，以減少手術(shù)感染的發(fā)生。醫(yī)學(xué)家還采取了高溫、紫外線、及甲醛等藥物對(duì)室內(nèi)器具、設(shè)備進(jìn)行消毒，對(duì)醫(yī)護(hù)人員和患者人身和衣物的消毒等種種措施，以改善處置室、手術(shù)室的工作環(huán)境。至此，手術(shù)室成為控制環(huán)境的一種設(shè)施的概念顯然已經(jīng)明確。這種手術(shù)室不僅是zui早的“無(wú)菌手術(shù)室”，而且是現(xiàn)代潔凈室的雛形，可以認(rèn)為“潔凈室”的概念既由此產(chǎn)生。
1880—1890年間，手術(shù)室無(wú)菌技術(shù)得到逐步完善。手術(shù)室的無(wú)菌技術(shù)包括對(duì)手術(shù)物品、人員手臂以及室內(nèi)空氣的 全面消毒。1886年，又發(fā)明了高溫滅菌的方法，并沿用至今。通過(guò)改善手術(shù)室的無(wú)菌條件以減少手術(shù)感染率，成為手術(shù)室設(shè)置的重要內(nèi)容之一。
19世紀(jì)末至20世紀(jì)初期，自然科學(xué)得到了迅速的發(fā)展，*次世界大戰(zhàn)和第二次世界大戰(zhàn)的爆發(fā)，加快了醫(yī)院手術(shù)室的變革和完善。無(wú)影燈的使用、X 光機(jī)的誕生、麻醉法的改進(jìn)、磺胺和青霉素的出現(xiàn)、通風(fēng)空調(diào)系統(tǒng)的完善，以及一系列醫(yī)療手術(shù)設(shè)備的應(yīng)用，大大改善了手術(shù)室的整個(gè)面貌，提高了手術(shù)室的工作效率，完善了手術(shù)室的工作條件，形成了設(shè)備、功能完善的近代手術(shù)室，為醫(yī)學(xué)外科學(xué)的迅速發(fā)展提供了有利的條件。
從20世紀(jì)50年代起，醫(yī)學(xué)外科學(xué)的發(fā)展進(jìn)入了一個(gè)嶄新的時(shí)期，許多從未涉足的外科手術(shù)室禁區(qū)被沖破。顯微外科、臟器移植、人工關(guān)節(jié)置換等要求高度無(wú)菌的外科手術(shù)的開展，對(duì)醫(yī)院手術(shù)室已經(jīng)難以滿足這種要求。原有的無(wú)菌手術(shù)室已經(jīng)達(dá)到一定的無(wú)菌狀態(tài)，但保持這種無(wú)菌狀態(tài)是困難的。因?yàn)殡S著手術(shù)操作過(guò)程中醫(yī)務(wù)人員自身的發(fā)菌和室外空氣的滲入，手術(shù)室原有的無(wú)菌狀態(tài)很快受到破壞，抗菌素的使用可以有效控制手術(shù)感染的發(fā)生，但人們很快就發(fā)現(xiàn)，大量持續(xù)使用抗生素可能帶來(lái)細(xì)菌的抗藥性和病人的藥物中毒。細(xì)菌在生長(zhǎng)期接觸抗生素后，由于選擇壓力的作用，迫使其改變抗生素作用的靶位蛋白結(jié)構(gòu)和數(shù)量，使菌體對(duì)抗生素不再敏感，或者通過(guò)外膜屏障與外流泵作用，一方面減少抗生素濃度，以逃避抗生素的扼殺。從長(zhǎng)遠(yuǎn)來(lái)看，大量使用抗生素的結(jié)果降低了患者自身免疫能力。在某些藥物使用一段時(shí)間后，國(guó)內(nèi)外許多醫(yī)院都 出現(xiàn)了感染人數(shù)增加的趨勢(shì)。如近年來(lái)曾被有效控制的結(jié)核病大副回潮，就是突出的例證。由于抗生素的研發(fā)滯后于細(xì)菌抗藥性的生成，因此，如何更有效地控制手術(shù)室的無(wú)菌環(huán)境，配合抗生素以控制感染，成為現(xiàn)代醫(yī)院需要解決的重要問(wèn)題。