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上海士鋒生物新技術(shù)在研究細(xì)胞分裂中的蛋白分離中的應(yīng)用
點(diǎn)擊次數(shù):815 發(fā)布時(shí)間:2013-8-12
染色體分離是細(xì)胞分裂過(guò)程中的關(guān)鍵步驟,近期一個(gè)由奧地利、德國(guó)等組成的科研小組運(yùn)用RNAi技術(shù)、蛋白定位等技術(shù)對(duì)近百種之前未被全面認(rèn)識(shí)的人類蛋白復(fù)合物進(jìn)行了全面的分析,相關(guān)研究成果發(fā)表在Science雜志上。
近年來(lái),利用酵母等真核模式生物突變體,研究人員克隆了一些調(diào)控細(xì)胞分裂早期姊妹染色體黏著和后期黏著素酶解的關(guān)鍵基因,初步闡明了染色體分離的分子調(diào)控機(jī)理.由多亞基蛋白組成的黏著素是保證染色體正確黏著和分離的關(guān)鍵分子。在細(xì)胞分裂中后期過(guò)渡時(shí),經(jīng)過(guò)一系列的分子識(shí)別和互作導(dǎo)致黏著素蛋白選擇性地降解,使染色體分離。
染色體分離與細(xì)胞分裂是關(guān)系生命體生存的關(guān)鍵生命活動(dòng)過(guò)程,在這2個(gè)過(guò)程中有大量的蛋白復(fù)合物參與調(diào)控。
近期,多國(guó)研究人員組成的聯(lián)合研究小組應(yīng)用RNAi技術(shù)對(duì)大量參與其中的蛋白質(zhì)復(fù)合物進(jìn)行掃描分析,整個(gè)過(guò)程鑒定了許多與染色體分離、細(xì)胞分裂相關(guān)的蛋白復(fù)合物,但是,關(guān)于這些蛋白復(fù)合物的功能研究卻十分罕見。
為了探明這些蛋白復(fù)合物,科學(xué)家們應(yīng)用基因標(biāo)簽技術(shù),蛋白定位技術(shù)、MitoCheck等技術(shù)分析100種人類蛋白復(fù)合物,這100種蛋白復(fù)合物大部分的還沒(méi)有被全面的了解。這項(xiàng)新的研究工作將在前人的基礎(chǔ)上,對(duì)這100個(gè)蛋白復(fù)合物進(jìn)行全面的分析。
這種高通量的分析有助人們了解蛋白復(fù)合物的亞基、復(fù)合體等多個(gè)結(jié)構(gòu)的生理功能。
這項(xiàng)研究大大加深了人們對(duì)于細(xì)胞分裂過(guò)程中染色體和蛋白分離的認(rèn)識(shí),對(duì)于進(jìn)一步了解相關(guān)蛋白復(fù)合物的功能提供了重要參考,也側(cè)面說(shuō)明了RNAi技術(shù)在科研工作中的廣闊應(yīng)用前景。
Systematic Analysis of Human Protein Complexes Identifies Chromosome Segregation Proteins
Chromosome segregation and cell division are essential, highly ordered processes that depend on numerous protein complexes. Results from recent RNA interference (RNAi) screens indicate that the identity and composition of these protein complexes is incompley understood. Using gene tagging on bacterial artificial chromosomes, protein localization and tandem affinity purification-mass spectrometry, the MitoCheck consortium has analyzed about 100 human protein complexes, many of which had not or only incompley been characterized. This work has led to the discovery of previously unknown, evolutionarily conserved subunits of the anaphase-promoting complex (APC/C) and the -tubulin ring complex (-TuRC), large complexes which are essential for spindle assembly and chromosome segregation. The approaches we describe here are generally applicable to high throughput follow-up analyses of phenotypic screens in mammalian cells.