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人類巴氏小體的觀察
點(diǎn)擊次數(shù)：907 發(fā)布時(shí)間：2017-2-22
一、目的
1，掌握人類x小體（巴氏小體）玻片標(biāo)本制作方法
2，觀察識(shí)別巴氏小體形態(tài)特征及所在部位，
鑒定個(gè)體的性別。
二、原理
巴氏小體又稱X小體：正常女性，位于間期細(xì)胞核中，緊貼核膜內(nèi)緣，大小約1～1.5 um，呈現(xiàn)三角或橢圓形小體，數(shù)量為x染色體數(shù)減一。巴氏小體是由于女性兩個(gè)X染色體中的一個(gè)失活形成的。
Lyon的劑量補(bǔ)償學(xué)說(shuō)認(rèn)為：女性有兩個(gè)X染色體，但所表達(dá)的絕大部分遺傳物質(zhì)與只有1個(gè)X染色體的男性是一樣多的。
這是因?yàn)榕缘?/span>X染色體中只有1個(gè)保持活性，而另一個(gè)是晚復(fù)制的，沒(méi)有活性。該失活的染色體在形態(tài)學(xué)上
呈異染色體，即DNA螺旋壓的很緊，染色深而致密，稱之為巴氏小體。
三、實(shí)驗(yàn)材料
口腔粘膜細(xì)胞，毛根鞘細(xì)胞顯微鏡，載玻片，蓋玻片，牙簽，吸管固定液（甲醇:冰醋酸＝3:1），生理鹽水，
苯酚品紅染液
四、實(shí)驗(yàn)步驟
1）取材
口腔粘膜細(xì)胞：受檢者清水漱口數(shù)次，用潔凈牙簽從女性口腔兩側(cè)刮取粘膜，原位刮2～3次，*次舍去，第2，3次分別涂于干凈載玻片上。
發(fā)根細(xì)胞：拔取女性帶有毛囊的頭發(fā)（約2cm），置于載玻片上。
2）固定
將置于離心管中的材料（口腔粘膜細(xì)胞），首先2000rpm離心20min，棄上清，加入新配置的固定液（甲醇:冰醋酸＝3:1），37℃下靜置30min，再1000rpm離心15min棄上清，加入1ml固定液（甲醇:冰醋酸＝3:1）制成細(xì)胞懸液。
置于載玻片上，待材料干后滴加固定液（95％乙醇:乙＝1:1）固定1h，空氣干燥。
3）染色、制片
細(xì)胞懸液一滴于載玻片上，固定20min，蒸餾水洗2～3min，1N鹽酸37℃水浴20min，晾干，滴加1～2滴染液染色20～30min（勿干），細(xì)水洗去染液，晾干。
直接涂片的：滴加染液，室溫20～30min（勿干），加蓋玻片，壓片。
發(fā)??細(xì)胞：拔掉毛干，直接滴加5N鹽酸于毛囊細(xì)胞處，處理5min，吸去鹽酸，滴加染液，染色20min，加蓋玻片，壓片。
五、鏡檢
在高倍鏡或油鏡下觀察（巴氏小體）
人類巴氏小體的觀察