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            離心機的選擇

            閱讀:5014      發(fā)布時間:2019-8-9
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            I 離心機的相關(guān)知識介紹                                                       

            離心技術(shù)主要用于各種生物樣品的分離和制備,生物樣品懸浮液在高速旋轉(zhuǎn)下,由于巨大的離心力作用,使懸浮的微小顆粒(細胞器、生物大分子的沉淀等)以一定的速度沉降,從而與溶液得以分離,而沉降速度取決于顆粒的質(zhì)量、大小和密度。

            ●     相對離心力(RCF)

             

            又稱為(g)力是在離心過程中實際施加在樣品上的作用力。

            RCF=1.18x離心半徑(mm)x(轉(zhuǎn)速/1000)2

               在離心過程中能夠直接設(shè)定離心力離心,可以使結(jié)果更加準確、可靠,更具有科學性。

            ●     轉(zhuǎn)速(rpm)

            通常以每分鐘多少轉(zhuǎn)來表示。相對離心力與轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)速的平方成正比。因此,轉(zhuǎn)速是決定離心力的主要因素。

            ●     離心半徑

            指轉(zhuǎn)子中軸到樣品管中心的距離,離心半徑與離心力成正比。不同的轉(zhuǎn)子具有不同的離心半徑。不同廠家相同容量的離心機轉(zhuǎn)子半徑不同,相同的轉(zhuǎn)速所得到的離心力也不同,

            對RCF會產(chǎn)生很大影響。

             

             

            綜上所述:轉(zhuǎn)速、離心半徑均對離心力產(chǎn)生較大影響,在實際使用過程中,能夠直接設(shè)定離心力,就可以把影響降到zui小。

             

             

             

            II 離心效果                                                                    

             

            ●     離心積分

            相對離心力和離心時間是決定離心效果的關(guān)鍵因素。但無法僅用這兩個參數(shù)來準確衡量離心效果。上*使用離心積分(HRF)來衡量離心效果。

                  離心積分是指離心過程中離心力對離心時間的積分。離心積分考慮了離心過程中各種影響因素對離心加速的影響,保證施加于樣品的離心力總量一致,從而保證一致的離心效果。離心積分還表明:短時間的高速離心和長時間的低速離心可以獲得相同的離心效果。

            ● 差速離心(differential centrifugation )

                  差速離心法是利用樣品中各種組分的沉降系數(shù)不同而進行分離的方法,又稱差分離心或差級離心。通常兩個組分的沉降系數(shù)差在10倍以上時可以用此法分離。在差速離心中細胞器沉降的順序依次為:核、線粒體、溶酶體與過氧化物酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高基體、zui后為核蛋白體。沉降系數(shù)差別在一個或幾個數(shù)量級的顆粒,可以用此法分離

               差速離心首先要選擇好顆粒沉降所需的離心力和離心時間,應(yīng)用方式與學科:

               1:分步改變離心速度,用不同強度的離心力使具有不同密度的物質(zhì)分批分離的方法。

            應(yīng)用學科:生物化學與分子生物學(一級學科);方法與技術(shù)(二級學科)

            2:利用不同物質(zhì)沉降速率的差異,在不同離心速度下分離和收集不同顆粒的離心技術(shù)。常用于分離細胞勻漿中的各種細胞器。

            應(yīng)用學科:細胞生物學(一級學科);細胞生物學技術(shù)(二級學科)

            差速離心法的優(yōu)點是樣品的處理量較大,用于大量樣品的初分離,可使用容量較大的轉(zhuǎn)子

             

             

             

            III  安全離心                                                            

              操作者的安全防護

                  樣品與轉(zhuǎn)子在高速離心狀態(tài)下會產(chǎn)生巨大的離心力,因此對使用者的安全保護是離心機設(shè)計的首要因素。

            ●     需用高強度材料

            【1】       環(huán)氧涂層鋼制材料:抵抗各種溶劑和碎片的侵蝕。

            【2】       鋼制結(jié)構(gòu),不銹鋼腔:高強度,抗腐蝕

            【3】       盔甲電鍍:當轉(zhuǎn)子或吊桶碎裂是,能夠起到保護腔體作用

            ●     不平衡保護,不平衡時自動停機,自動失衡識別。

            ●     轉(zhuǎn)子自動識別【高速離心機】,超速保護。防止使用者誤操作導(dǎo)致危險的發(fā)生

            ●     自動平衡,無需配平

            ●     保證轉(zhuǎn)子高速運轉(zhuǎn)時突然發(fā)生軸斷裂時:

            【1】       轉(zhuǎn)子不會飛出

            【2】       離心力外表看不成變形

            【3】       斷電后能正常開蓋

            【4】       內(nèi)腔體變形不超過:3mm

            【5】       離心機在試驗臺上不發(fā)生水平位移

            ●     使用者需與離心機保持至少30cm的安全距離

            ●     溫度控制,保證生物樣品活性

            離心常見的溫度設(shè)定為:4℃,20,  37℃ ,其中以4℃(生物零度)zui為重要,這就要求離心機具備預(yù)制冷功能、定溫啟動功能,保證樣品一放入就處于安全溫度下離心。

            Ⅳ  舒適離心                                                                 

               低噪音設(shè)計:

             通常離心機噪音范圍為55—70dBA;

             65dBA為可接受的噪音水平

            <60dBA為較好的噪音水平

            每增加3dBA相當于增加一倍的噪音效果

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