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HPLC常見故障及排除方法
點擊次數(shù)：1753 發(fā)布時間：2014-6-16
色譜柱的維護
1.大多數(shù)反相色譜柱的pH穩(wěn)定范圍是2-7.5，盡量不超過該色譜柱的pH范圍
2.避免流動相組成及極性的劇烈變化
3.使用預(yù)柱保護分析柱（硅膠在極性流動相/離子性流動相中有一定的溶解度）
4.如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相，應(yīng)在實驗完畢柱子沖洗干凈，保存大乙腈中
5.流動相使用前必須經(jīng)脫氣和過濾處理
液相色譜儀色譜柱使用及維護
每天用足夠的時間來平衡色譜柱，您就會在處理問題方面獲得zui大的"補償"，而且您的色譜柱的壽命也會變得更長!------ 一定得做!
新的色譜柱在使用之前應(yīng)該在您自己的液相色譜儀上進(jìn)行性能測試，即使用色譜柱附帶的檢驗報告上測試條件和樣品來測定該色譜柱的柱效。并且，在以后的使用中，應(yīng)時常對色譜柱進(jìn)行測試。
卡套柱的安裝（不加預(yù)柱）
1.將卡套架套入柱芯
2.將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽，使柱芯高于夾套
3.將已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高過夾套片
4.將卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手?jǐn)Q緊
5.然后依同樣的順序連接好柱子的另一端
6.連接到液相色譜儀，PEEK接頭手?jǐn)Q即可;若為不銹鋼接頭應(yīng)使用扳手
注意：使用卡套柱時，兩端的卡套應(yīng)時刻連接在柱芯上。不管您是平衡色譜柱或是清洗，任何時候都不能將卡套取下來，否則會造成填料的流失。
卡套柱的安裝（加預(yù)柱）
1.將卡套架套入柱芯
2.將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽，使夾套高于柱芯
3.將已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高過夾套片
4.將"子彈頭"預(yù)柱放入卡套片內(nèi)
5.將卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手?jǐn)Q緊
6.然后依同樣的順序連接好柱子的另一端
7.連接到液相色譜儀，PEEK接頭手?jǐn)Q即可;若為不銹鋼接頭應(yīng)使用扳手更換色譜柱濾網(wǎng)和玻璃棉過濾片（同時可以修補色譜柱）
注意：在取出反相柱芯的濾網(wǎng)和玻璃片之前，應(yīng)該將色譜柱充分用水和甲醇/乙腈沖洗，而且修補工具的頭部也應(yīng)該蘸取少量的甲醇/乙腈，以避免在取出濾網(wǎng)和玻璃棉濾片時帶出柱子內(nèi)的填料。
1.將修補工具中的2套入柱芯的頂端
2.將修補工具中的3輕輕地旋入已套著2的柱芯中，并順時針方向旋轉(zhuǎn)到旋緊
3.一手握柱芯，另一只手輕輕地向外拉3，取出柱芯頂端的濾網(wǎng)
4.用一個小鏟子輕輕地取出濾網(wǎng)下面的玻璃棉以及被污染的填料
5.將新的填料用甲醇潤濕，然后填入挖去的部位，壓平
6.裝上新的玻璃棉濾網(wǎng)，并用修補工具中的4將玻璃棉壓入柱芯頂端
7.柱芯頂端套上2，然后將濾網(wǎng)放入
8.壓緊，然后取下2，再用4將濾網(wǎng)的邊緣壓平
平衡色譜柱 反相色譜柱在經(jīng)過出廠測試后是保存在乙腈/水中的。請一定確保您所使用的流動相和乙腈/水互溶。由于色譜柱在儲存或運輸過程中可能會干掉，因此在用流動相分析樣品之前，應(yīng)使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈平衡色譜柱;如果您所使用的流動相中含有緩沖鹽，應(yīng)注意用純水"過渡"。
如何平衡色譜柱?
平衡過程中，將流速緩慢地提高
用流動相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線（緩沖鹽或離子對試劑度如果較低，則需要較長的時間來平衡）