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            拓赫機(jī)電科技(上海)有限公司

            Tissuelyser-48擬南芥或水稻穗RNA快速提取步驟兩種方法

            時(shí)間:2012-10-11閱讀:3134
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            *種 濕磨法

            1.取打碎機(jī)適配器于-80°冷凍約15min。
            2.取一指節(jié)長度的花序,好帶上一片葉子,(材料量可多可少,7d大小的苗地上部分也能提出RNA),放入國產(chǎn)2ml EP管中, 加一粒鋼珠,液氮速凍。之后用鑷子取出,快速加入適配器中。(好用國產(chǎn)的EP管即可,進(jìn)口的管子液氮凍過后,容易裂)
            3.打碎15s,50HZ。(水稻嫩葉為。45S,60HZ 老葉為,70S 60HZ)
            4.將材料再次放入液氮中。
            5.用磁鐵吸出鋼珠,加入1ml Trizol,余下步驟即正常的RNA提取步驟。

            第二種 干磨法

            1.取一指節(jié)長度的花序(材料量可多可少,7d大小的苗地上部分也能提出RNA),放入國產(chǎn)2ml EP管中,加一粒鋼珠,400ul Trizol。
            2.打碎1min 50HZ (水稻嫩葉為。45S,60HZ 老葉為,70S 60HZ) 。
            3.吸出鋼珠,補(bǔ)600ul Trizol。
            4.余下步驟即正常的RNA提取步驟。
            注意:鋼珠遇到Trizol 會(huì)被溶解一部分,所以之后的提取液是黃色的(有鐵離子),不必在意,之后異丙醇那一步鐵離子會(huì)和上清一起別棄掉。

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