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            上海北諾生物科技有限公司

            中級(jí)會(huì)員·14年

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            中級(jí)會(huì)員·14年
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            021-57730393
            機(jī):
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            86-021-61496710
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            蛋白質(zhì)技術(shù)專題:血漿游離血紅蛋白測定

            2013-12-5  閱讀(1243)

            分享:
            實(shí)驗(yàn)原理
             
            血紅蛋白具有類過氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態(tài)氧,使鄰甲聯(lián)苯胺氧化發(fā)生顏色變化,由無色zui終變?yōu)樗{(lán)紫色。根據(jù)顯色深淺與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較,可測出其含量。
             
            實(shí)驗(yàn)方法
             
            材料:
             
            1.2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液
             
            2.1%H2O2
             
            3.10%醋酸溶液
             
            4.分光光度計(jì)
             
            方法:
             
            1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿。
             
            2.按下表進(jìn)行操作,用分光光度計(jì),波長為530nm,以空白管調(diào)零,測定測定管的吸光度。

             
            試劑 (ml)
            測定管
            空白管
            2 g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液
            0.5
            0.5
            患者血漿
            0.02
            /
            1% H2O2
            0.5
            0.5
            混勻后室溫放置10min
            10%醋酸溶液
            5.0
            5.0
            室溫放置10min

            3.計(jì)算公式
             
            血漿游離Hb(mg/L)=測定管吸光度/標(biāo)準(zhǔn)管吸光度×100
             
            實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算
             
            參考范圍:0-40mg/L
             
            注意事項(xiàng)
             
            1.一切容器避免血紅蛋白污染;
             
            2.采血要順利,器皿要干燥,檢測血漿要新鮮,及時(shí)分離,防止人為溶血;
             
            3.鄰聯(lián)苯胺溶液具致癌性,檢測時(shí)要小心,廢液要妥善處理,以免污染;
             
            4.雙氧水要新鮮配置,濃度要準(zhǔn)確。

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