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技術(shù)文章
人類染色體核型分析實驗
點擊次數(shù)：4244 發(fā)布時間：2014-1-2
人類染色體核型分析實驗
實驗原理
核型（karyotype）一詞在20世紀(jì)20年代首先由蘇聯(lián)學(xué)者T. A. Levzky等人提出。核型分析的發(fā)展有三項技術(shù)起了很重要的促進(jìn)作用，一是1952年美籍華人細(xì)胞學(xué)家徐道覺發(fā)現(xiàn)的低滲處理技術(shù)，使中期細(xì)胞的染色體分散良好，便于觀察；二是秋水仙素的應(yīng)用便于富集中期細(xì)胞分裂相；三是植物凝集素（PHA）刺激血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化、分裂，使以血培養(yǎng)方法觀察動物及人的染色體成為可能。
核型是指染色體組在有絲分裂中期的表型，包括染色體數(shù)目、大小、形態(tài)特征等。核型分析是對染色體進(jìn)行測量計算的基礎(chǔ)上，進(jìn)行分組、排隊、配對并進(jìn)行形態(tài)分析的過程。核型分析對于探討人類遺傳病的機制、物種親緣關(guān)系與進(jìn)化、遠(yuǎn)緣雜種的鑒定等都有重要意義。將一個染色體組的全部染色體逐個按其特征描繪下來，再按長短、形態(tài)等特征排列起來的圖像稱為核型模式圖，它代表一個物種的核型模式。
1960年，丹佛會議上，提出了人類有絲分裂染色體命名標(biāo)準(zhǔn)體制草案，為以后的所有命名方法奠定了基礎(chǔ)。1963年，倫敦會議上，正式批準(zhǔn)Patan 提出的A、B、C、D、E、F、G七個字母表示七組染色體的分類法。1966年，芝加哥會議上，提出人類染色體組和畸變速記符號的標(biāo)準(zhǔn)命名體制。
A組（1-3號）
1號：zui大的中央著絲粒染色體，長臂靠近著絲粒外有次縊痕。
2號：zui大的亞中著絲粒染色體。
3號：中央著絲粒染色體，比1號小三分之一。
B組（4-5號）：為較大的亞中央著絲粒染色體，二者不易區(qū)分。
C組（6-12號，X）：中等近中央著絲粒染色體，彼此難區(qū)分。
6、7、9、11號：著絲粒略近中央。
8、10、12號：偏離中央。
9號：q有次縊痕。
X位于6、7之間。
D組（13-15號）：中等近端著絲點染色體，p常有隨體。
E組（16-18號）
16號：中等中央著絲粒染色體，q上有次縊痕。
17號：較小，近中央著絲粒染色體。
18號：較小，近中央著絲粒染色體，p比17號更短。
F組（19-20號）：小的中央著絲粒染色體，彼此不易區(qū)分。
G組（21-22號，Y）：小的近端著絲粒染色體。
21、22號：p常有隨體，q常呈分枝狀彼此不易區(qū)分。
Y：p無隨體，q通常平行靠近。
人類染色體核型分析實驗
實驗試劑
Geimsa染色液等。
實驗設(shè)備
攝影顯微鏡，顯微測微尺，染色缸，吹風(fēng)機等。
實驗材料
人外周血淋巴細(xì)胞染色體標(biāo)本
實驗步驟
1、將人外周血淋巴細(xì)胞染色體標(biāo)本放入染色缸，用Geimsa染色液染色10-15分鐘→在盛水塑料杯中沖涮→風(fēng)干→鏡檢
觀察細(xì)胞的標(biāo)準(zhǔn)為：
（1）細(xì)胞完整，輪廓清晰，染色體分布在同一水平面上。
（2）染色體形態(tài)和分布良好。
（3）無重疊，即使有個別重疊，也要能明確辯認(rèn)，以免差錯。
（4）所觀察的細(xì)胞處于同一有絲分裂階段，即染色體螺旋化程度或染色體長短大致一樣。
（5）在所觀察的細(xì)胞周圍，沒有離散的單個或多個染色體存在，以免影響計數(shù)。
2、顯微攝影：將制好的片子放在數(shù)碼攝影顯微鏡下進(jìn)行拍攝，以供分析。
3、核型分析
核型：一個細(xì)胞內(nèi)所有染色體按一定順序排列起來，代表著某一個體所有細(xì)胞的染色體組成，包括數(shù)目、形態(tài)、大小等，分為A、B、C、D、E、F、G等七組和一組性染色體。
組型：把核型按模式圖的形式表現(xiàn)出來，代表一個種的染色體組成。
4、完成染色體組型分析。
注意事項
顯微照片分析：
染色體計數(shù)；染色體測量；
相對長度=單個染色體長度/ 整套單倍染色體總長×100
臂比率=q/p
著絲點指數(shù)=p/(p q) ×100
人類染色體核型分析實驗