液體ECC（定量）顯色培養(yǎng)基說明書

液體ECC（定量）顯色培養(yǎng)基說明書

可同時對水樣中β-葡萄糖醛酸酶陽性大腸桿菌和大腸菌群檢測和計數(shù)

組 分

蛋白胨和酵母粉：16.0 g/L   

氯化鈉：5.0 g/L  

色素：4.5 g/L

pH值 7.1

操作

1、取瓶內(nèi)干粉25.5 g溶于1000mL去離子水的潔凈三角瓶中，充分?jǐn)嚢杌靹?。也可根?jù)需要按照25.5 g/L的比例擴(kuò)大或縮小制備培養(yǎng)基的量。

2、加熱至100℃，不停攪拌，使其*溶解。切勿加熱超過100℃，切勿121℃高壓滅菌。若使用微波爐加熱，應(yīng)將培養(yǎng)基加熱沸騰，立即移出，輕輕搖勻，再放入微波爐加熱，觀察小氣泡變?yōu)榇髿馀?，直?溶解即可。切勿使培養(yǎng)基溢出。

3、冷卻至室溫備用。

接種

樣品（如水樣）可按以下步驟進(jìn)行：

• 1.將墊片A放于培養(yǎng)皿內(nèi)。       
• 2.用移液管移取2.0 ml制備好的培養(yǎng)基加入墊片A上。
• 3.取出膜B，將膜B置于過濾系統(tǒng)中。
• 4.將水樣置于過濾系統(tǒng)中抽濾。
• 5.取出抽濾后的膜B，將膜B放于含有墊片A的培養(yǎng)皿內(nèi)。
• 6.將含有A和B的培養(yǎng)皿置于35±2℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18-24h后即可讀取結(jié)果（注：不要倒置培養(yǎng)皿）。

結(jié)果

性能及局限

對大腸桿菌靈敏度和特異性分別為99.1%和96.9%（Ho and Tam 1997）。葡萄糖醛酸酶陰性大腸桿菌（如：大腸桿菌O157）可能出現(xiàn)假陰性結(jié)果，如果主要研究病原菌如大腸桿菌O157，可選用科瑪嘉大腸桿菌O157顯色培養(yǎng)基。若研究主要研究總大腸菌群，罕見的哈夫尼菌屬出現(xiàn)假陰性結(jié)果，為無色菌落。

貯存條件

干粉需保存于15℃~30℃干燥環(huán)境中，在有效期前使用。制備好的液體培養(yǎng)基在冰箱內(nèi)保存2周（2℃~8℃，避光）。

污染處理

使用過的培養(yǎng)基需要在121℃滅菌至少20分鐘才可以按照有關(guān)規(guī)定丟棄。