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滬鼎教您正確操作小鼠β淀粉樣蛋白elisa試劑盒實驗
閱讀：807 發(fā)布時間：2014-4-22| 提 供 商 | 上海滬鼎生物科技有限公司 | 資料大小 | 93KB |
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| 資料類型 | PNG 圖片 | 瀏覽次數(shù) | 807次 |
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品牌：RD TSZ
規(guī)格：96T 48T
：葉（）
保存：；2-8℃。
有效期：6個月
供應商：上海滬鼎生物科技有限公司
1、標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
1000μg/L 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
500μg/L 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
250μg/L 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
125μg/L 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
62.5μg/L 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2、加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3、溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4、配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
5、洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6、加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7、溫育：操作同3。
8、洗滌：操作同5。
9、顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10、終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11、測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
應用雙抗體夾心法測定標本水平。用純化抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入，再與HRP標記的抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品濃度。
清明剛一過，五一又迎來，上海滬鼎生物新品“小鼠elisa試劑盒”已隆重上市！我公司代理美國RD、TSZ等ELISA試劑盒，規(guī)格：48T/96T，訂購或了解本新品，歡迎您。