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“上海滬鼎”文獻(xiàn)：板藍(lán)根與抗內(nèi)毒素藥效作用及化學(xué)基礎(chǔ)研究
閱讀：715 發(fā)布時間：2019-5-9| 提 供 商 | 上海滬鼎生物科技有限公司 | 資料大小 | 136.7KB |
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常曉波（漢中三二0一醫(yī)院，陜西 漢中 723000）
[摘 要] 目的：探討板藍(lán)根抗內(nèi)毒素的作用效果。方法：兩組均通過板藍(lán)根處理小鼠腹腔巨噬細(xì)胞，試驗組另使用LPS刺激，觀察TNF-α和IL-6的產(chǎn)生情況。結(jié)果：板藍(lán)根預(yù)處理小鼠腹腔巨噬細(xì)胞能明顯降低TNF-α和IL-6的量（P＜0.05），抑制率有差異。結(jié)論： 板藍(lán)根抗內(nèi)毒素作用效果明顯。
[關(guān)鍵詞] 板藍(lán)根；內(nèi)毒素；巨噬細(xì)胞；LPS；TNF-α；IL-6
板藍(lán)根是十字花科植物菘藍(lán)的根，是臨床上常用的清熱解毒的中藥，具有抗菌、抗病毒、抗癌、增強免疫力、抗細(xì)菌內(nèi)毒素等多種功能[1]。腫瘤壞死因子TNF-α、白細(xì)胞介素-6（IL-6）等， 進(jìn)而引起機體發(fā)熱、休克、血管內(nèi)彌散性凝血等反應(yīng)，對患者造成嚴(yán)重的損傷，甚至死亡。以小鼠腹腔巨噬細(xì)胞作為對象，研究板藍(lán)根對LPS刺激產(chǎn)生TNF-α和IL-6的作用，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。
1資料與方法
1.1一般資料：①試劑：板藍(lán)根購于遼寧中醫(yī)藥大學(xué)中藥房，
LPS（湛江安度斯生物有限公司，010203），小鼠TNF-αELISA 試劑盒（ 江萊生物科技有限公司， 貨號： ELISA 2266 ）， 小鼠IL-6 ELISA試劑盒（上海滬鼎生物科技有限公司，HD-
30163k）。②實驗動物：周齡4周的昆明小鼠，20 g左右，雌雄各15只，均購于北京維通利華有限公司。
1.2實驗方法
1.2.1小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的制備：給予昆明小鼠腹腔注射2 mg/ 只BCG，4 d后經(jīng)過脫頸椎處死小鼠，給小鼠腹腔注射5 ml含有100 U/ml青霉素、100 μg/ml鏈霉素和10 U/ml肝素的RPMI160
（GIBCO）培養(yǎng)液，輕柔腹部，抽取腹腔液體，1 500 r/min，
5 min， 用RPMI 160 洗滌細(xì)胞兩次， 接種于含10 % 胎牛血清
（Hyclone）的RPMI160培養(yǎng)液，于37℃，5% O2，95% CO2的培養(yǎng)箱（Thermo）中進(jìn)行培養(yǎng)2 h，洗去未貼壁的細(xì)胞，剩下的貼壁細(xì)胞即為巨噬細(xì)胞。
1.2.2板藍(lán)根溶液的配置：取100 g板藍(lán)根置于700 ml蒸餾水煎煮
1.5 h，濾渣加500 ml蒸餾水繼續(xù)煎煮1 h，過濾，將所有濾液濃縮至100 ml。
1.2.3 分組處理：取2×106個細(xì)胞/ml至于24孔板，隨機分為兩組，5孔/組，其中板藍(lán)根組每孔加1 ml板藍(lán)根處理細(xì)胞1 h，然后加LPS至終濃度50 ng/ml，對照組不加板藍(lán)根預(yù)處理，直接加LPS 處理，24 h后，取上清液用ELISA檢測TNF-α和IL-6的含量，抑制率=（1－板藍(lán)根處理組含量/對照組含量）×100%。
1.3 統(tǒng)計學(xué)處理： 使用SPSS 17 . 0 對各項資料進(jìn)行統(tǒng)計、分析， 各項參數(shù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x ? s ） 表示， 采用t 和χ 2 檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
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